[發(fā)明專利]具有強特異性的半胱氨酸熒光分子探針及其合成方法與應(yīng)用、以及含有其的試劑盒有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202210725347.7 | 申請日： | 2022-06-23 |
| 公開（公告）號： | CN114957271B | 公開（公告）日： | 2023-10-24 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 劉美慧;曾文彬;李石;方煜博;龍儀;劉祖源 | 申請（專利權(quán)）人： | 湖南超亟檢測技術(shù)有限責(zé)任公司 |
| 主分類號： | C07D491/052 | 分類號： | C07D491/052;C09K11/06;G01N21/64 |
| 代理公司： | 株洲湘知知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 43232 | 代理人： | 李麗平 |
| 地址： | 412007 湖南省長沙市高*** | 國省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 具有 特異性 半胱氨酸 熒光 分子 探針 及其 合成 方法 應(yīng)用 以及 含有 試劑盒 | ||
1.一種具有強特異性的半胱氨酸熒光分子探針，所述分子探針具有式Ⅰ所示的結(jié)構(gòu)式：
2.一種具有強特異性的半胱氨酸熒光分子探針的合成，其特征在于：包括以下步驟：
(1)將化合物TPC溶解于二氯甲烷，加入乙二酰氯和DMF，反應(yīng)結(jié)束后濃縮干燥，然后再溶解于二氯甲烷，加入苯酚、4-二甲氨基吡啶和三乙胺至反應(yīng)結(jié)束，用飽和碳酸氫鈉溶液淬滅反應(yīng)，萃取后干燥濃縮，最后層析純化，得式Ⅱ所示中間物：
(2)式Ⅱ中間物與Lawesson試劑、對二甲苯反應(yīng)至結(jié)束，濃縮后層析純化得到式Ⅰ所示目標(biāo)分子探針：
3.如權(quán)利要求2所述的具有強特異性的半胱氨酸熒光分子探針的合成，其特征在于：所述步驟(1)中乙二酰氯和DMF的加入方式為0-5℃攪拌加入，然后在室溫下繼續(xù)攪拌至反應(yīng)結(jié)束。
4.如權(quán)利要求2所述的具有強特異性的半胱氨酸熒光分子探針的合成，其特征在于：所述步驟(1)中1mmol TPC加入5-10mL二氯甲烷、0.1mL DMF，加入的乙二酰氯與TPC量的比為1.2:1；反應(yīng)結(jié)束且干燥后再次溶解時1mmol TPC對應(yīng)的產(chǎn)物中加入的二氯甲烷為2-3mL，苯酚為1-1.2mmol，4-二甲氨基吡啶為0.1-0.5mmol，三乙胺為3-4mmol。
5.如權(quán)利要求2所述的具有強特異性的半胱氨酸熒光分子探針的合成，其特征在于：所述步驟(1)中萃取時先用DCM或乙酸乙酯萃取，再用飽和氯化鈉溶液萃取有機層。
6.如權(quán)利要求2所述的具有強特異性的半胱氨酸熒光分子探針的合成，其特征在于：所述步驟(2)中反應(yīng)時在140℃惰性氣體保護下攪拌反應(yīng)至結(jié)束。
7.如權(quán)利要求2所述的具有強特異性的半胱氨酸熒光分子探針的合成，其特征在于：所述步驟(2)中1mmol式Ⅱ化合物中加入1.4-1.5mmol Lawesson試劑，1.5-2mL對二甲苯。
8.一種權(quán)利要求1所述的具有強特異性的半胱氨酸熒光分子探針的應(yīng)用：其特征在于，所述熒光分子探針在半胱氨酸檢測試劑盒中的應(yīng)用。
9.一種半胱氨酸檢測試劑盒，其特征在于：所述試劑盒包括權(quán)利要求1所述的熒光分子探針，以及半胱氨酸檢測組合物。
10.如權(quán)利要求9所述的半胱氨酸檢測試劑盒，其特征在于：半胱氨酸檢測組合物包括半胱氨酸標(biāo)準(zhǔn)品和溶劑，其中溶劑為PBS緩沖液和乙腈的混合溶液。
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C07D 雜環(huán)化合物
C07D491-00 雜環(huán)化合物，在稠環(huán)系中含有1個或多個有氧原子作為僅有的雜環(huán)原子的環(huán)，且含有1個或多個有氮原子作為僅有的雜環(huán)原子的環(huán)，不包含在C07D 451/00至C07D 459/00、C07D 463/00、C0
C07D491-02 .在稠環(huán)系中含有兩個雜環(huán)
C07D491-12 .在稠環(huán)系中含有3個雜環(huán)
C07D491-22 .在稠環(huán)系中含有4個或更多個雜環(huán)
C07D491-14 ..鄰位稠合系
C07D491-16 ..迫位稠合系
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