[發明專利]一種熱穩定的堿性磷酸酶抗體偶聯物的制備方法在審
| 申請號： | 202110259373.0 | 申請日： | 2021-03-10 |
| 公開（公告）號： | CN113004508A | 公開（公告）日： | 2021-06-22 |
| 發明（設計）人： | 高玉舟;李海超;喬善鵬;何欣;劉珍妮 | 申請（專利權）人： | 濟南國科醫工科技發展有限公司 |
| 主分類號： | C08G63/91 | 分類號： | C08G63/91;C12N9/16;C12N9/96;G01N33/535 |
| 代理公司： | 濟南譽豐專利代理事務所(普通合伙企業) 37240 | 代理人： | 薛鵬喜 |
| 地址： | 250000 山東省濟南市高新區綜合保稅*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 穩定 堿性磷酸酶 抗體 偶聯物 制備 方法 | ||
1.一種聚合交聯劑PGA(SPO3)24的合成方法，其特征在于，包括以下步驟：
將PGA和半胱胺S-磷酸鹽溶解于去離子水中，加入EDC反應，將得到的產物純化，然后冷凍干燥，制得聚合交聯劑PGA(SPO3)24。
2.根據權利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述PGA、EDC和半胱胺S-磷酸鹽的質量比為1:1:(0.1～0.4)。
3.權利要求1或2所述的合成方法制備得到的聚合交聯劑PGA(SPO3)24。
4.權利要求3所述的PGA(SPO3)24在如下1)或2)中的應用：
1)交聯堿性磷酸酶；
2)提高堿性磷酸酶抗體偶聯物的穩定性。
5.利用權利要求3所述的PGA(SPO3)24對堿性磷酸酶進行交聯的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)用琥珀酰亞胺-4-(N-馬來酰亞胺)環已烷-1-1羥酸酯修飾堿性磷酸酶表面的氨基，使分子表面的氨基衍生出馬來酰胺基團，得到SMCC修飾的堿性磷酸酶；
(2)將步驟(1)得到的SMCC修飾的堿性磷酸酶堿與PGA(SPO3)24交聯，得到聚合物交聯堿性磷酸酶。
6.權利要求5所述的方法制備得到的聚合物交聯堿性磷酸酶。
7.利用權利要求6所述的聚合物交聯堿性磷酸酶對抗體進行偶聯的方法，其特征在于，包括以下步驟：
STMCC分子的兩端分別與交聯化堿性磷酸酶表面的巰基、抗體表面的氨基反應，使交聯化堿性磷酸酶與抗體發生偶聯。
8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述STMCC分子中含有NHS活性酯基團的一端與抗體表面的氨基反應得到STMCC衍生化后的抗體。
9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述STMCC衍生化后的抗體中STMCC分子含有馬來酰胺基團的一端與交聯化堿性磷酸酶表面的巰基反應，使得交聯化堿性磷酸酶與抗體偶聯。
10.權利要求7～9任一項所述的方法制備得到的聚合物交聯堿性磷酸酶抗體偶聯物。
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