[發明專利]谷子葉片直接PCR擴增的方法在審
| 申請號： | 202110239198.9 | 申請日： | 2021-03-04 |
| 公開（公告）號： | CN112813150A | 公開（公告）日： | 2021-05-18 |
| 發明（設計）人： | 汪杰;陳慶春;彭國雄;黃剛;劉付界 | 申請（專利權）人： | 重慶大學;阜陽華大生命科學研究院 |
| 主分類號： | C12Q1/686 | 分類號： | C12Q1/686 |
| 代理公司： | 北京細軟智谷知識產權代理有限責任公司 11471 | 代理人： | 劉靜榮 |
| 地址： | 400000 *** | 國省代碼： | 重慶;50 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 谷子 葉片 直接 pcr 擴增 方法 | ||
1.谷子葉片直接PCR擴增的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
(1)將谷子葉片放入MgCl2溶液終濃度為4mM的PCR反應體系中，谷子葉片的體積為1uL；
(2)進行PCR擴增。
2.根據權利要求1所述的谷子葉片直接PCR擴增的方法，其特征在于，所述PCR擴增包括以下步驟：
(a)預變性：94℃5min，1個循環；
(b)擴增：94℃30s，55℃30s，72℃20s，35個循環；
(c)再延伸：72℃10min，1個循環；
(d)保存：4℃10min，1個循環。
3.根據權利要求1所述的谷子葉片直接PCR擴增的方法，其特征在于，所述PCR反應體系包括PCR MASTER MIX 20～30uL、引物1～2uL、ddH2O 15～25uL、20mM MgCl2溶液2～3uL，PCR反應體系的體積為50uL。
4.根據權利要求3所述的谷子葉片直接PCR擴增的方法，其特征在于，所述PCR MASTERMIX包括Taq DNA Polymerase、dNTP混合物、MgCl2溶液以及緩沖液。
5.根據權利要求3所述的谷子葉片直接PCR擴增的方法，其特征在于，向所述PCR反應體系中添加2.5uL 20mM MgCl2溶液。
6.根據權利要求3或4所述的谷子葉片直接PCR擴增的方法，其特征在于，所述PCRMASTER MIX中含有3mM MgCl2溶液。
7.根據權利要求3所述的谷子葉片直接PCR擴增的方法，其特征在于，所述引物包括正向引物F和反向引物R，其中，
正向引物F：5’-CGTTTAGTAATGACATAATT-3’；
反向引物R：5’-GCAGAATAAGGTAAGCTTAT-3’。
8.根據權利要求1所述的谷子葉片直接PCR擴增的方法，其特征在于，所述谷子葉片選自新鮮嫩葉。
9.根據權利要求1所述的谷子葉片直接PCR擴增的方法，其特征在于，所述谷子葉片的形狀為圓形，谷子葉片的直徑為1～3mm。
10.根據權利要求1所述的谷子葉片直接PCR擴增的方法，其特征在于，將PCR反應體系置于EP管中，震蕩混勻后瞬時離心，進行PCR擴增。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于重慶大學;阜陽華大生命科學研究院，未經重慶大學;阜陽華大生命科學研究院許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.17sss.com.cn/pat/books/202110239198.9/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
- 上一篇：一種治療皮膚病的中藥酊劑及其制備方法
- 下一篇：一種隔膜分切機及分切裝置
