[發明專利]一種益生菌體系的制備方法及其應用有效
| 申請號： | 202011291977.5 | 申請日： | 2020-11-18 |
| 公開（公告）號： | CN112972503B | 公開（公告）日： | 2022-02-08 |
| 發明（設計）人： | 董磊;韓叢薇 | 申請（專利權）人： | 南京大學 |
| 主分類號： | C12N1/20 | 分類號： | C12N1/20;A61K33/06;A61K33/00;A61K33/12 |
| 代理公司： | 北京智丞瀚方知識產權代理有限公司 11810 | 代理人： | 任冠舉 |
| 地址： | 210023 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 菌體 制備 方法 及其 應用 | ||
1.一種益生菌體系的制備方法，其特征在于，所述方法包括：
步驟1：將益生菌與無菌的無機材料混合后進行厭氧培養；具體做法為：將濃度為0.001-0.1g/ml的無機材料懸液與cfu為2×104～2×109的益生菌菌液以體積比為10：1-1：10的比例混合，在25-40℃，0-200rpm條件下厭氧培養4h-96h；
步驟2：分離純化；
在所述步驟1之前進行益生菌活化，即將益生菌在25-40℃，0-200rpm條件下厭氧培養；
所述步驟1之前進行無機材料活化，即將無菌的無機材料在等滲緩沖液中攪拌10min-1h，形成無機材料懸液；所述等滲緩沖液為：磷酸鹽緩沖液（PBS）、生理鹽水和TBS中的至少一種；
所述益生菌選自乳桿菌、雙歧桿菌中的一種或幾種；
所述無機材料是雙八面體蒙脫石(Dioctahedral Smectites)亞族、三八面體蒙脫石(Trioctahedral Smectites)亞族、硅藻土、高嶺土、凹凸棒土、介孔二氧化硅和金屬骨架二氧化硅中的至少一種。
2.權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述分離純化采用：過濾、離心、凍干、透析和梯度離心中的至少一種。
3.按照權利要求1-2中任意一項所述的制備方法獲得的益生菌體系，其特征在于，所述益生菌體系在惡性腫瘤治療過程中的應用；所述惡性腫瘤為惡性黑色素瘤、乳腺癌、結直腸癌、肉瘤、肝癌、肺癌或宮頸癌。
4.權利要求1-2中任意一項所述的制備方法在制備抑制惡性腫瘤生長藥物中應用，其特征在于，所述惡性腫瘤為惡性黑色素瘤、乳腺癌、結直腸癌、肉瘤、肝癌、肺癌或宮頸癌。
5.按照權利要求1-2中任意一項所述的制備方法獲得的益生菌體系在制備惡性腫瘤治療藥物中的應用，其特征在于，所述惡性腫瘤治療藥物包括有，含有所述益生菌體系的藥物和可與該藥物聯合使用的化療及免疫治療藥物；所述惡性腫瘤為惡性黑色素瘤、乳腺癌、結直腸癌、肉瘤、肝癌、肺癌或宮頸癌。
6.按照權利要求1-2中任意一項所述的制備方法獲得的益生菌體系在制備用于腹瀉、便秘、消化不良、高血壓、潰瘍性結腸炎中的任一項病癥的治療藥物中的應用。
7.一種用于治療惡性腫瘤的藥物，其特征在于，所述藥物包括按照權利要求1-2中任意一項所述的制備方法獲得的益生菌體系，所述惡性腫瘤為惡性黑色素瘤、乳腺癌、結直腸癌、肉瘤、肝癌、肺癌或宮頸癌。
8.根據權利要求7所述的藥物，其特征在于，該藥物還包括用于治療惡性腫瘤腫的化療藥和/或免疫治療藥物。
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