[發明專利]FRT細胞株在制備篩選TRPV4調節劑的制劑或試劑盒中的應用在審
| 申請號： | 202011073280.0 | 申請日： | 2020-10-09 |
| 公開（公告）號： | CN112375843A | 公開（公告）日： | 2021-02-19 |
| 發明（設計）人： | 郝峰;李明光;張麗;鄭鍇;肖云萍;解宇浩;張嘉琪 | 申請（專利權）人： | 吉林醫藥學院 |
| 主分類號： | C12Q1/6897 | 分類號： | C12Q1/6897;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 北京集佳知識產權代理有限公司 11227 | 代理人： | 張柳 |
| 地址： | 132000 吉林*** | 國省代碼： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | frt 細胞株 制備 篩選 trpv4 調節劑 制劑 試劑盒 中的 應用 | ||
1.FRT細胞株在制備篩選TRPV4調節劑的制劑或試劑盒中的應用；
所述FRT細胞株中ANO1和YFP-H148Q/I152L共表達；
所述FRT細胞株通過熒光信號反應細胞內Ca2+濃度的變化進而篩選TRPV4調節劑；
所述熒光信號為相對熒光強度變化值/slope值/斜率值，所述相對熒光強度變化值/slope值/斜率值與TRPV4調節劑濃度成劑量依賴關系；
其中，相對熒光強度變化值/slope值/斜率值與細胞內Ca2+濃度呈現良好的正相關；
所述相對熒光強度變化值/slope值/斜率值計算如下：
0s～1.4s的相對熒光值的平均值；
y：2.4s～14.8s與0.6s～13s做線性回歸分析所得到的線性回歸的結果。
2.如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述TRPV4調節劑包括激活劑或抑制劑；所述激活劑包括GSKl016790A、4α-PDD或RN-1747中的一種或多種；所述抑制劑包括GSK2193874、HC-067047、RN-1734。
3.FRT細胞株在制備預防和/或治療與TRPV4通道相關疾病的藥物中的應用；所述FRT細胞株中ANO1和YFP-H148Q/I152L共表達；
所述FRT細胞株通過熒光信號反應細胞內Ca2+濃度的變化進而篩選TRPV4調節劑；
所述熒光信號為相對熒光強度變化值/slope值/斜率值，所述相對熒光強度變化值/slope值/斜率值與TRPV4調節劑濃度成劑量依賴關系；
其中，相對熒光強度變化值/slope值/斜率值與細胞內Ca2+濃度呈現良好的正相關；
所述相對熒光強度變化值/slope值/斜率值計算如下：
0s～1.4s的相對熒光值的平均值；
y：2.4s～14.8s與0.6s～13s做線性回歸分析所得到的線性回歸的結果。
4.如權利要求3所述的應用，其特征在于，所述與TRPV4通道相關疾病包括血管疾病、動脈粥樣硬化、神經疾病、水腫、疼痛、胃腸道疾病、肺部疾病中的一種或多種；所述肺部疾病包括咳嗽，支氣管收縮，肺動脈高壓和急性肺損傷中的一種或多種。
5.篩選TRPV4調節劑的制劑或試劑盒，其特征在于，包括FRT細胞株以及可接受的助劑；所述FRT細胞株中ANO1和YFP-H148Q/I152L共表達；
所述FRT細胞株通過熒光信號反應細胞內Ca2+濃度的變化進而篩選TRPV4調節劑；
所述熒光信號為相對熒光強度變化值/slope值/斜率值，所述相對熒光強度變化值/slope值/斜率值與TRPV4調節劑濃度成劑量依賴關系；
其中，相對熒光強度變化值/slope值/斜率值與細胞內Ca2+濃度呈現良好的正相關；
所述相對熒光強度變化值/slope值/斜率值計算如下：
0s～1.4s的相對熒光值的平均值；
y：2.4s～14.8s與0.6s～13s做線性回歸分析所得到的線性回歸的結果。
6.預防和/或治療與TRPV4通道相關疾病的藥物，其特征在于，采用FRT細胞株篩選獲得；所述FRT細胞株中ANO1和YFP-H148Q/I152L共表達；
所述FRT細胞株通過熒光信號反應細胞內Ca2+濃度的變化進而篩選TRPV4調節劑；
所述熒光信號為相對熒光強度變化值/slope值/斜率值，所述相對熒光強度變化值/slope值/斜率值與TRPV4調節劑濃度成劑量依賴關系；
其中，相對熒光強度變化值/slope值/斜率值與細胞內Ca2+濃度呈現良好的正相關；
所述相對熒光強度變化值/slope值/斜率值計算如下：
0s～1.4s的相對熒光值的平均值；
y：2.4s～14.8s與0.6s～13s做線性回歸分析所得到的線性回歸的結果。
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