[發明專利]一種生物樣品檢測方法及檢測試劑盒在審
| 申請號： | 202010592579.0 | 申請日： | 2020-06-24 |
| 公開（公告）號： | CN111830251A | 公開（公告）日： | 2020-10-27 |
| 發明（設計）人： | 王哲;柳可;熊貴 | 申請（專利權）人： | 瑞芯智造（深圳）科技有限公司 |
| 主分類號： | G01N33/537 | 分類號： | G01N33/537;G01N33/543;G01N33/68;G01N33/74;G01N33/58;G01N15/10 |
| 代理公司： | 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205 | 代理人： | 胡輝 |
| 地址： | 523725 廣東省深圳市龍華區觀瀾*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 生物 樣品 檢測 方法 試劑盒 | ||
1.一種生物樣品檢測方法，其特征在于：包括如下步驟：
(1)將修飾有第一結合物的磁珠與含有待分析物的樣品、修飾有第二結合物的標記物混合，得混合液；
(2)除去混合液中未結合的修飾有第二結合物的標記物；
(3)將步驟(2)處理后的混合液中的標記物與磁珠分離；
(4)去除樣品中的磁珠，通過對標記物進行計數和/或電荷、粒徑測量得出樣品中待分析物的含量以及種類；
其中，第一結合物和第二結合物分別依次與所述待分析物的第一結合位點、第二結合位點特異性結合。
2.根據權利要求1的檢測方法，其特征在于：步驟(2)的方法為：在磁場的控制下，吸附混合物中的磁珠，除去混合液中未結合的修飾有第二結合物的標記物，磁場的強度不低于0.0001T。
3.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于：步驟(3)中，標記物和磁珠的分離方法為：
1)利用解離劑，解離磁珠與第一結合物的連接或第二結合物與標記物的連接；
或者2)使用第一結合物的競爭分子、待分析物的競爭分子、或第二結合物的競爭分子使得標記物被從磁珠上替換下來；
或者3)特異性分解酶分解第一結合物、待分析物或第二結合物；
或者4)采用以上方法的組合。
4.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于：步驟(4)是通過磁場吸附，去除樣品中的磁珠；標記物的計數采用納米孔計數法、或者NTA檢測法、或者納米流式計數法、或者數字熒光計數法檢測。
5.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于：所述標記物為直徑在10nm～1000nm的顆粒。
6.根據權利要求5所述的檢測方法，其特征在于：所述的標記物為聚乙烯微球，二氧化硅微球，納米金或者熒光微球。
7.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于：第一結合物或第二結合物為抗原、抗體、受體、或者是適配體。
8.根據權利要求7所述的檢測方法，其特征在于：第一結合物與磁珠的修飾方式，或者第二結合物與標記物的修飾方式為硝基芐基與DNA分子鏈的鍵合，或者是二硫代乙基氨基與羧基的鍵合，或者是磺酸鹽與寡核苷酸的鍵合，或者是6C或12C有機分子鏈與生物素的鍵合。
9.根據權利要求1-8任一項所述的檢測方法，其特征在于：
所述待分析物為一種或一種以上；
對應地，所述第一結合物為一種或一種以上，每種第一結合物分別與對應的待分析物的第一結合位點特異性結合，第一結合物修飾在磁珠的表面；
對應地，所述第二結合物為一種或一種以上，每種第二結合物分別與對應的待分析物的第二結合位點特異性結合，每種第二結合物分別修飾到不同的標記物的表面，每種標記物在尺寸和/或表面電位上有可測量的差異；
根據標記物的尺寸和/或表面電位，來區分不同標記物的種類并計數，從而得到樣品中待分析物的種類和含量。
10.根據權利要求9所述的檢測方法，其特征在于，每種標記物的直徑差異在5％以上，或者表面電位差異在10％以上。
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