本發明涉及一種燈盞細辛注射液的一測多評定量檢測方法，該方法以野黃芩苷和3,5?O?二咖啡?？鼘幩釣閷φ掌?，通過一測多評法定量燈盞細辛注射液中野黃芩苷和二咖啡酸酯類化合物3,5?O?二咖啡?？鼘幩?、3,4?O?二咖啡?？鼘幩?、4,5?O?二咖啡酰奎寧酸、飛蓬酯乙和燈盞細辛酯，并通過指紋圖譜控制燈盞細辛注射液批間質量穩定性，本檢測方法具有一測多評，測試結果準確穩定，節省測試時間及成本的優勢。

技術領域

本發明涉及一種燈盞細辛注射液的一測多評定量檢測方法，屬于中藥檢測領域。

技術背景

燈盞細辛注射液是云南生物谷藥業股份有限公司生產的小容量注射液，由燈盞細辛藥材提取純化精制而成。其中主要成分為黃酮類和咖啡酸酯類成分。黃酮類成分主要為野黃芩苷和燈盞花甲素，咖啡酸酯類成分主要有咖啡酸，3-O-咖啡酰奎寧酸，4-O-咖啡酰奎寧酸，5-O-咖啡酰奎寧酸，3，4-O-二咖啡?？鼘幩?，3，5-O-二咖啡酰奎寧酸，4，5-O-二咖啡?？鼘幩?，飛蓬酯乙和燈盞細辛酯。而其中主要的咖啡酸酯成分為二咖啡酸酯類成分。

現行藥典標準有如下不足：1、含量測定項中咖啡酸酯類總量采用紫外分光光度法在305nm波長處測定吸收度，計算咖啡酸酯物質的總量。但是，燈盞細辛注射液中除了有咖啡酸酯，還有其他黃酮、小分子芳香酸，γ-吡喃酮等多種酚類化合物，這些成分在305nm波長均有紫外吸收，所以采用紫外分光光度法測定咖啡酸酯的總量時，不僅是檢測咖啡酸酯成分的紫外吸收，還包括黃酮及其它酚類成分紫外吸收的總和，因此，選用紫外分光光度法作為測定方法缺乏專屬性。2、原標準方法準確度不夠，同上述理由，305nm波長處不僅有咖啡酸酯成分的紫外吸收，還包括黃酮及其它酚類成分紫外吸收的總和，且這個波長并不是所有咖啡酸酯成分的最大吸收波長，另外，以1，3-O-二咖啡酰奎寧酸作為對照，1，3-DQC在燈盞細辛注射液里沒有，此成分存在于根中，以前的燈盞細辛注射液是用野生草，野生草采收是直接連根拔出來，現在種植的，用的是前兩次收割品，因而沒有此成分。計算時沒有引入相對校正因子，僅進行簡單的計算，所獲得的數據缺乏準確性。

植物藥化學成分復雜，同類藥效成分的含量測定是植物藥質量控制的共識。以往多用紫外光譜法定量測定同一類物質，或者用外標法測定每一個單一成分加和起來得到藥品中同一類物質的含量數值。這樣不但面臨對照品難得，檢驗周期長還耗能、耗時。而一測多評法通過用單一或者混合的對照溶液，根據同一類有效成分間存在的內在函數關系和比例關系法，測定一個成分(較易獲得，化學物理性質較穩定)實現多個成分(較難獲得對照品，化學物理性質相對不太穩定)同時測定。較好地縮短測定時間，節約對照品，降低質量控制成本。

發明內容

針對上述技術問題，發明人提供了一種燈盞細辛注射液的一測多評定量檢測方法，其中，所述檢測方法測定總二咖啡酸酯和野黃芩苷的含量，所述方法包括以下步驟：

1)混合對照品的制備，將所檢測物質的對照品按照燈盞細辛注射液中各成分的濃度進行相應濃度配置；

2)供試品溶液配置，所述燈盞細辛注射液使用乙二胺四乙酸二鈉溶液進行稀釋配置；

3)色譜條件與系統適用性實驗，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；流速為0.8-1.2ml/min，流動相A為甲醇：乙腈25-35：65-75，流動相B為0.05-0.4％的三氟乙酸，流動相A與流動相B的比例為16～20：84～80；總二咖啡酸酯的檢測波長為324～330nm、野黃芩苷的檢測波長為333～340nm，理論板數按3，5-O-二咖啡酰奎寧酸峰計算應不低于5000，柱溫35～45℃。

4)分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定相關含量。

在本檢測方法中，發明人采用了多種對照品進行混合，所述對照品包括：野黃芩苷、3，5-O-二咖啡?？鼘幩?、3，4-O-二咖啡?？鼘幩帷?，5-O-二咖啡?？鼘幩?、飛蓬酯乙和燈盞細辛酯的一種或多種。優選為野黃芩苷、3，5-O-二咖啡?？鼘幩?、3，4-O-二咖啡?？鼘幩?、4，5-O-二咖啡?？鼘幩帷w蓬酯乙和燈盞細辛酯的混合。