[發明專利]一種殼聚糖修飾的納米酶黏膜免疫佐劑及流感黏膜疫苗及其制備方法有效
| 申請號： | 202010513410.1 | 申請日： | 2020-06-08 |
| 公開（公告）號： | CN111617241B | 公開（公告）日： | 2022-08-05 |
| 發明（設計）人： | 高利增;秦濤;陰銀燕;彭大新;陳素娟;馬尚 | 申請（專利權）人： | 揚州大學 |
| 主分類號： | A61K39/145 | 分類號： | A61K39/145;A61P31/16;A61K39/39;B82Y5/00 |
| 代理公司： | 北京高沃律師事務所 11569 | 代理人： | 董大媛 |
| 地址： | 225009 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 聚糖 修飾 納米 黏膜 免疫佐劑 流感 疫苗 及其 制備 方法 | ||
1.一種殼聚糖修飾的納米酶黏膜免疫佐劑，其特征在于，由以下步驟制備得到：
無水氯化鐵的乙二醇溶液與三水醋酸鈉混合，得到的懸濁液和殼聚糖混合，再在198～202℃加熱反應11～13h，得到的黑色沉淀物為殼聚糖修飾的納米酶；所述氯化鐵和殼聚糖的質量比為(0.83～8.2):1；
所述殼聚糖為低分子量殼聚糖；所述低分子量殼聚糖為50～190KDa。
2.根據權利要求1所述的黏膜免疫佐劑，其特征在于，所述三水醋酸鈉和殼聚糖的質量比為(0.37～3.6)：1。
3.根據權利要求1或2所述的納米酶黏膜免疫佐劑，其特征在于，所述黏膜免疫佐劑的直徑為180～250nm；
所述黏膜免疫佐劑的表面帶正電荷；
所述黏膜免疫佐劑催化H2O2的過氧化物酶活Vmax/Km為0.5～1.31。
4.一種流感黏膜疫苗，其特征在于，流感病毒呈球狀通過靜電作用力結合在權利要求1～3任意一項所述殼聚糖修飾的納米酶黏膜免疫佐劑表面，每個納米酶黏膜免疫佐劑的圓周上結合7～8個流感病毒。
5.根據權利要求4所述流感黏膜疫苗，其特征在于，所述流感黏膜疫苗的表面帶正電。
6.根據權利要求4所述流感黏膜疫苗，其特征在于，所述流感病毒包括H1N1流感病毒。
7.根據權利要求4所述流感黏膜疫苗，其特征在于，流感黏膜疫苗在鼻腔黏膜黏附的數量比單獨流感病毒的黏附數量增加了30倍以上；
所述流感黏膜疫苗在鼻腔黏膜黏附的時間延長為12h以上。
8.一種流感黏膜疫苗的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
將純化的流感病毒滅活，將滅活的流感病毒溶液和權利要求4~7任意一項所述殼聚糖修飾的納米酶溶液混合，振蕩，得到流感黏膜疫苗；
滅活的流感病毒和殼聚糖修飾的納米酶的配比按滅活的流感病毒的蛋白質量與殼聚糖修飾的納米酶的質量計算；滅活的流感病毒的蛋白與殼聚糖修飾的納米酶的質量比為3：(1～20)。
9.根據權利要求8所述制備方法，其特征在于，當所述流感病毒為H1N1流感病毒時，所述滅活的流感病毒溶液的蛋白濃度為0.5～1.5mg/mL；所述殼聚糖修飾的納米酶溶液的濃度為0.5～10mg/mL；所述滅活H1N1流感病毒溶液和所述殼聚糖修飾的納米酶溶液的體積比(1～3)：1。
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