[發明專利]一種脫落酸二醇的分離純化方法在審
| 申請號: | 202010116030.4 | 申請日: | 2020-02-25 |
| 公開(公告)號: | CN111285762A | 公開(公告)日: | 2020-06-16 |
| 發明(設計)人: | 周金燕;楊杰;鐘娟;譚紅 | 申請(專利權)人: | 中國科學院成都生物研究所 |
| 主分類號: | C07C59/46 | 分類號: | C07C59/46;C07C51/42;C07C51/47;C07C51/43 |
| 代理公司: | 成都坤倫厚樸專利代理事務所(普通合伙) 51247 | 代理人: | 汪賀玲 |
| 地址: | 610041 四川*** | 國省代碼: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 脫落酸 分離 純化 方法 | ||
1.一種脫落酸二醇的分離純化方法,其特征在于:將含有脫落酸二醇的發酵液除去固形物后,將發酵清液進行吸附、解析,收集解析液,減壓濃縮得脫落酸二醇粗品;再經吸附柱層析分離,以及結晶、重結晶純化,得到脫落酸二醇結晶產物。
2.根據權利要求1所述的一種脫落酸二醇的分離純化方法,其特征在于:包括以下步驟:
(1)將經過微生物發酵后的含有脫落酸二醇的發酵液經過濾后,得到發酵清液;
(2)將得到的發酵清液用大孔吸附樹脂吸附,然后用解析劑進行解析,得到解析液,并經減壓濃縮得到浸膏;
(3)將所述浸膏經吸附柱層析,得到的洗脫液經減壓濃縮后,進行結晶、重結晶和干燥得到脫落酸二醇結晶產物。
3.根據權利要求2所述的一種脫落酸二醇的分離純化方法,其特征在于:步驟(1)中,將發酵液用氫氧化鈉調節pH值至2~6。
4.根據權利要求2所述的一種脫落酸二醇的分離純化方法,其特征在于:步驟(2)中,所述大孔吸附樹脂為S-8、DA-201、D-101、X-5、DM-130、DM301中的任意一種。
5.根據權利要求2所述的一種脫落酸二醇的分離純化方法,其特征在于:步驟(2)中,所述解析劑為低級醇,所述低級醇為甲醇或乙醇,所述低級醇的體積濃度為20~100%。
6.根據權利要求5所述的一種脫落酸二醇的分離純化方法,其特征在于:所述低級醇的體積濃度為80~100%。
7.根據權利要求1所述的一種脫落酸二醇的分離純化方法,其特征在于:步驟(3)中,利用吸附柱層析對浸膏進行多次分離,以硅膠為固定相,以20~50%石油醚/乙酸乙酯為流動相進行洗脫,將得到的洗脫液進行合并。
8.根據權利要求7所述的一種脫落酸二醇的分離純化方法,其特征在于:步驟(3)中,在減壓濃縮后的洗脫液中加入結晶溶劑,進行結晶、重結晶。
9.根據權利要求8所述的一種脫落酸二醇的分離純化方法,其特征在于:所述結晶溶劑為乙醇或甲醇。
10.根據權利要求1所述的一種脫落酸二醇的分離純化方法,其特征在于:所述微生物為葡萄孢霉屬或尾孢霉屬。
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