[發(fā)明專利]一種同時(shí)檢測血液樣品中多種水溶性維生素的方法及其應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010074354.6 | 申請日： | 2020-04-01 |
| 公開（公告）號： | CN111175406B | 公開（公告）日： | 2023-04-18 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 張召;刁嘉茵;雷春燕;肖妮;陳濤 | 申請（專利權(quán)）人： | 廣東南芯醫(yī)療科技有限公司;廣東一元蘭欣生物科技有限公司 |
| 主分類號： | G01N30/02 | 分類號： | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/88 |
| 代理公司： | 廣州嘉權(quán)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 44205 | 代理人： | 胡輝 |
| 地址： | 510000 廣東省廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 同時(shí) 檢測 血液 樣品 多種 水溶性 維生素 方法 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種血液水溶性維生素的檢測方法，其特征在于，采用液質(zhì)聯(lián)用方法進(jìn)行檢測，包括以下步驟：
一.溶液的制備
供試品溶液制備：取血液樣品加入到甲醇、乙腈溶液中，混勻離心，取上清后再加入水：甲醇，得供試品溶液；
標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備：將各標(biāo)準(zhǔn)品用甲酸和甲醇/水溶液溶解配制成標(biāo)準(zhǔn)品母液，將各標(biāo)準(zhǔn)品母液用乙腈/甲醇進(jìn)行稀釋至同一容量瓶中，得到系列不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液；
內(nèi)標(biāo)溶液制備：將各內(nèi)標(biāo)用甲酸和甲醇/水溶液溶解配制成內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品母液，將各內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品母液用乙腈/甲醇進(jìn)行稀釋至同一容量瓶中，得到系列不同濃度的混內(nèi)標(biāo)溶液；
二.測定
將上述制備的供試品溶液、標(biāo)準(zhǔn)品和內(nèi)標(biāo)溶液進(jìn)行LC-MS測定；
色譜柱為WATERS?ACQUITY?UPLC色譜柱：2.1?mm×100?mm，1.7μm；
其中洗脫采用梯度方式洗脫，流動相A為10mM乙酸銨和0.01%甲酸混合的水溶液，流動相B為0.01%甲酸和10mM乙酸銨混合的乙腈溶液；
梯度洗脫程序?yàn)椋?-1.5?min?98%?B，1.5-2.5?min?98%-85%?B，2.5-6?min?85%-50%?B，6-7.5?min?50%-25%?B，7.5-7.51?min?25%-98%?B，7.51-10?min?98%?B；
MS檢測過程中組分測量參數(shù)如下所示：
。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述血液樣品為血液中血漿或血清樣品。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述供試品溶液制備的操作為：取樣品200～300μL，加入甲醇：乙腈溶液800～900μL，混勻，離心，取上清氮?dú)獯蹈珊蠹尤爰状既芤旱霉┰嚻啡芤骸?/p>
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，MS檢測的條件為：
電噴霧離子源ESI源；采用正離子掃描模式；霧化氣流量：3?L/min；加熱氣流量:10?L/min；接口溫度：300℃；加熱塊溫度：400℃；DL溫度：250℃；干燥氣流量：10?L/min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于：柱溫為35～40℃。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的檢測方法，其特征在于，所述柱溫為35℃。
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