[發明專利]一種鑒別糙海參卵巢發育期雌參個體的方法有效
| 申請號： | 201911153121.9 | 申請日： | 2019-11-22 |
| 公開（公告）號： | CN110720413B | 公開（公告）日： | 2021-04-06 |
| 發明（設計）人： | 陳廷;任春華;胡超群;李小敏;吳菲菲;江曉 | 申請（專利權）人： | 中國科學院南海海洋研究所 |
| 主分類號： | A01K61/30 | 分類號： | A01K61/30;A01K61/90;G01N33/68;C07K14/775;C07K1/14 |
| 代理公司： | 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001 | 代理人： | 劉明星;朱聰聰 |
| 地址： | 511458 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 鑒別 海參 卵巢 發育期 個體 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種鑒別糙海參卵巢發育期雌參個體的方法，其特征在于，包括以下步驟：
抽取糙海參的體腔液，然后超速離心分離出卵黃蛋白，再經SDS-PAGE電泳和染色，通過電泳結果將卵巢發育期的雌參、雄參以及性腺未發育的糙海參區別開來；
所述的通過電泳結果將卵巢發育期的雌參、雄參以及性腺未發育的糙海參區別開來是在200-250kDa處有明顯條帶的為卵巢發育期雌參個體，而性腺未發育個體和雄性個體均不具備特征條帶，由此鑒別出糙海參卵巢發育期雌參個體；
所述的超速離心分離出卵黃蛋白是將含有濃度為1mM PMSF、密度為1.215g/mL的KBr的溶液4mL加入超速離心管底部，將1mL糙海參的體腔液加入超速離心管上部，在Himac CP100MX超速離心機，使用P100AT-0132轉子，以180,000g轉速、10℃離心24h，取上部300μL液體，即為包含卵黃蛋白的溶液。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的染色是考馬斯亮藍染色。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的抽取糙海參的體腔液是用預先加入蛋白酶抑制劑PMSF溶液的注射器穿過糙海參體壁，插入到達體腔，抽取體腔液。
4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述的蛋白酶抑制劑PMSF溶液是100mMPMSF的溶液。
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