[發明專利]鑒定芥藍與紅菜苔種間雜種及追蹤其后代材料A05和C04染色體分離情況的分子標記有效
| 申請號： | 201910825446.0 | 申請日： | 2019-09-03 |
| 公開（公告）號： | CN110423842B | 公開（公告）日： | 2022-04-22 |
| 發明（設計）人： | 李錫香;張曉輝;宋江萍;王海平 | 申請（專利權）人： | 中國農業科學院蔬菜花卉研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 成都方圓聿聯專利代理事務所(普通合伙) 51241 | 代理人： | 胡文莉 |
| 地址： | 100081 北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 鑒定 芥藍 菜苔 間雜 追蹤 后代 材料 a05 c04 染色體 分離 情況 分子 標記 | ||
1.鑒定芥藍與紅菜苔種間雜種及追蹤其后代材料A05和C04染色體分離情況的SSR分子標記的引物C04a，引物C04a的前向引物序列如SEQ ID No.1所示，引物C04a的后向引物序列如SEQ ID No.2所示。
2.權利要求1所述的引物C04a在鑒定芥藍與紅菜苔種間雜種及追蹤其后代材料A05和C04染色體分離情況上的應用，其特征在于，用引物C04a作為PCR擴增的引物，以待鑒定的植株及芥藍與紅菜苔親本DNA為模板進行PCR擴增，檢測PCR擴增產物進行條帶統計和基因型分析，芥藍帶型為254bp的擴增片段，紅菜苔帶型為263bp的擴增片段。
3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，條帶統計和基因型分析的方法為：待鑒定的植株為芥藍與紅菜苔雜交的F1植株時，若F1植株共顯芥藍帶型和紅菜苔帶型，則該植株為真雜種；若檢測的F1植株只顯示芥藍帶型或只顯示紅菜苔帶型，則該植株為假雜種。
4.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，待鑒定的植株為遠緣雜種自交后代植株時，若檢測的遠緣雜種自交后代植株共顯芥藍帶型和紅菜苔帶型，則該植株為芥藍C04染色體和紅菜苔A05染色體整條或部分雜合；若檢測的遠緣雜種自交后代植株只顯芥藍帶型，則該植株不含紅菜苔A05染色體整條或部分；若檢測的遠緣雜種自交后代植株只顯紅菜苔帶型，則該植株不含芥藍C04染色體整條或部分。
5.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，待鑒定的植株為以芥藍為回交親本的回交后代時，若檢測的植株共顯芥藍帶型和紅菜苔帶型，則該植株含有紅菜苔A05染色體整條或部分；若只顯示芥藍帶型，則該植株不含紅菜苔A05染色體整條或部分。
6.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，待鑒定的植株為以紅菜苔為回交親本的回交后代時，若檢測的植株共顯芥藍帶型和紅菜苔帶型，則該植株含有芥藍C04染色體整條或部分；若只顯示紅菜苔帶型，則該植株不含芥藍C04染色體整條或部分。
7.根據權利要求2-6任一項所述的應用，其特征在于，PCR擴增參數為：
反應體系為：10-50μL，其中包括：1×PCR 含Mg2+ Buffer，0.5-100 ng 模板DNA，0.2 mMdNTPs，0.5 μM SEQ ID No.1 primer，0.5 μM SEQ ID No.2 primer，1U Taq酶；
反應條件：94-95℃ 0.5-3 min；94-95℃ 30s, 55-60℃ 30S, 72℃ 30S, 35循環; 72℃ 5-10 min。
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