本發明涉及一種三疣梭子蟹WNT4基因及應用，涉及三疣梭子蟹基因工程，該三疣梭子蟹WNT4基因基因序列如SEQ NO.1所示，本發明還提供一種制備三疣梭子蟹三疣梭子蟹WNT4基因重組蛋白的方法，其特征在于包括以下步驟：(1)構建三疣梭子蟹WNT4基因重組表達載體；(2)將步驟(1)所得重組表達載體導入宿主細胞，并將宿主細胞進行誘導表達，獲得表達產物；(3)將分離純化步驟(2)所得的表達產物，獲得重組蛋白；與現有技術相比，本發明具有如下優點：三疣梭子蟹WNT4基因可能廣泛參與了三疣梭子蟹附肢再生的分子機制，Wnt信號傳導的下游效應包括廣泛的細胞反應，例如細胞命運決定，增殖和分化。

技術領域

本發明涉及分子生物學領域，尤其涉及一種三疣梭子蟹WNT4基因及其應用。

背景技術

斷肢再生是動物肢體損壞、自然脫落或者自殘之后全部或部分重新生成的現象,是動 物的-種自我保護機制，多種動物均存在斷肢再生的現象，有研究表明蟹類在斷肢后具有 較強的再生能力。三疣梭子蟹苗種培育、養殖、運輸過程中存在因蟹互相攻擊及其它物理 損傷造成的附肢斷肢現象,影響了蟹的攝食和運動能力,且斷肢處易發生感染,造成蟹的 成活率和養殖產量下降,經濟損失巨大,因此斷肢個體能否成功再生出附肢對提高三疣梭 子蟹存活率和經濟效益具有重要作用。我們使用RNA測序來構建與三疣梭子蟹中肢體再 生相關的基因表達譜，這是蟹附肢再生的第一個轉錄組研究我們的研究結果表明，WNT4及WNT信號通路參與三疣梭子蟹的肢體再生。Wnt信號傳導首先被鑒定為其在癌發生中 的作用，但后來因其在胚胎中的功能而被認可發展。Wnt信號通過Wnt蛋白配體與α蛋白 的結合激活通路卷曲的受體，在細胞里它將生物信號傳遞給蛋白質。他們是高度進化的， 且人類和果蠅保守。關于節肢動物，果蠅含有7個Wnt基因，并且Wnt4基因的功能具有 最全面的研究。但在甲殼類動物，關于Wnt4基因的表達和功能知之甚少。

發明內容

本發明所要解決的一個技術問題是針對現有技術的現狀提供一種三疣梭子蟹的WNT4基因。

本發明所要解決的另一個技術問題是針對現有技術的現狀提供一種三疣梭子蟹的 WNT4基因的應用。

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為：其特征在于：該三疣梭子蟹WNT4基因為PtWNT4，所述PtWNT4的核苷酸序列如SEQ NO.1所示。

所述的三疣梭子蟹WNT4基因的氨基酸序列為：