一種利用ISSR體系分析玉米螟種群遺傳多樣性的方法，它涉及玉米螟種群遺傳多樣性的方法；本發明是要解決目前沒有一種有效的分子標記方法，尤其是ISSR分子標記方法用于鑒別玉米螟，尤其是亞洲玉米螟的不同地理種群的遺傳結構及親緣關系，從而明確玉米螟遷移變化情況的問題；本發明提供了一種利用ISSR體系分析玉米螟種群遺傳多樣性的方法。該方法是一種簡單，易于操作的分子標記技術，該方法所選用的14條ISSR引物序列，在玉米螟中PCR擴增反應穩定，擴增片段清晰，多態性高，可為玉米螟資源鑒定、遺傳多樣性分析等科學研究提供技術支持。本發明應用于玉米螟領域。

技術領域

本發明屬于分子生物學領域，具體涉及一種利用ISSR體系分析玉米螟種群遺傳多樣性的方法。

背景技術

自然界中的絕大多數物種會因為其行為習性差異以及不對稱的環境因子導致基因流的不隨機性，從而使不同區域的物種種群間發生不同程度的遺傳差異。由于這種不同種群間發生分化形成新物種現象的發生也產生了種群遺傳結構多樣性以及種群遺傳學。

分子標記是目前研究種群遺傳學的重要技術之一，隨著分子生物學研究技術手段的迅猛發展，不斷出現了各種分子標記技術，ISSR分子標記是以SSR分子標記技術為基礎衍生出的技術具有SSR分子標記的優點，能夠達到在基因組上擴增并快速有效地檢測出基因組DNA上的多態性，且適用物種范圍廣，還可以揭示不同個體間SSR位點變異信息以及能夠提供多位點信息，操作方便，成本低，重復性好，適合大樣本檢測，且ISSR分子標記技術采用的引物序列較長，多態性好，與普通的SSR分子標記技術相比提高了實驗結果的可靠性。目前，ISSR分子標記技術廣泛應用在種群遺傳學、種質資源、分類學與種系發生學等研究方向。但目前采用ISSR分子標記對昆蟲種內及種間遺傳多樣性分析的研究較少，大多集中在植物種質資源的研究中，而在對玉米螟種群遺傳多樣性的研究相對較少。

玉米螟俗稱玉米鉆心蟲，屬于鱗翅目，螟蛾科，是世界性害蟲。玉米螟主要有亞洲玉米螟和歐洲玉米螟兩種，前者主要分布于印度、東南亞、中國(包括臺灣省)、朝鮮、日本、澳大利亞及太平洋西部的許多島嶼；后者幾乎遍及世界各國，其中受害嚴重的有美國、加拿大及歐洲和非洲許多國家。廣泛分布于歐洲、北美洲、東亞、南亞、大洋洲及太平洋上的一些島嶼。在中國，這兩種玉米螟都有分布，但以亞洲玉米螟為主。亞洲玉米螟在我國的分布范圍跨越了很大的經緯度，由于其成蟲飛行擴散能力強，若干代(年)后，可能使得相鄰的或不同生態區域的種群之間發生基因交流，使不同區域的物種種群間發生不同程度的遺傳差異。

黑龍江省是我國玉米種植面積第一大省，同時也是我國玉米產量第一大省。近些年，隨著雜交玉米的推廣和栽培技術的改進，加上氣候的變化，使黑龍江省玉米種植分布從最初的一、二積溫帶擴展到三、四積溫帶，玉米螟繁衍生息發生了變化，也表明亞洲玉米螟在黑龍江省的擴散形勢非常嚴峻。為了減少玉米螟的危害，人們大量噴灑化學農藥，再加上玉米又釋放有毒的次生代謝物使得玉米螟產生抗藥性。因此亞洲玉米螟在黑龍江省的分布擴散現狀非常嚴峻。

亞洲玉米螟不同地理種群遺傳結構分析對于其物種演變、擴散及綜合防治等反方面具有重要意義。

發明內容

本發明的目的是為了解決目前沒有一種有效的分子標記方法，尤其是ISSR分子標記方法用于鑒別玉米螟，尤其是亞洲玉米螟的不同地理種群的遺傳結構及親緣關系，從而玉米螟遷移變化情況的問題，而提供了一種利用ISSR體系分析玉米螟種群遺傳多樣性的方法。該方法是一種簡單，易于操作的分子標記技術，可為玉米螟資源鑒定、遺傳多樣性分析等科學研究提供技術支持。

本發明公開了一種用于玉米螟種群遺傳多樣性分析的ISSR分子標記引物，所述的引物序列包括：

引物807：其核苷酸序列如序列表Seq ID No：1所示；

引物810：其核苷酸序列如序列表Seq ID No：2所示；

引物818：其核苷酸序列如序列表Seq ID No：3所示；