[發(fā)明專利]一種細(xì)菌總數(shù)的快速檢測方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201811525024.3 | 申請日： | 2018-12-13 |
| 公開（公告）號： | CN109576339A | 公開（公告）日： | 2019-04-05 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 李抄;陳盟;杜耀華;程智;李玲君;呂蒙 | 申請（專利權(quán)）人： | 軍事科學(xué)院系統(tǒng)工程研究院衛(wèi)勤保障技術(shù)研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/06 | 分類號： | C12Q1/06;G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京高沃律師事務(wù)所 11569 | 代理人： | 劉奇 |
| 地址： | 300171 *** | 國省代碼： | 天津;12 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 細(xì)菌 釋放劑 快速檢測 體細(xì)胞 檢測 待測樣本 發(fā)光試劑 細(xì)菌總數(shù)檢測 檢測靈敏度 應(yīng)用范圍廣 熒光檢測儀 待測樣品 換算公式 熒光數(shù)據(jù) 熒光信號 游離 消耗 釋放 | ||
1.一種細(xì)菌總數(shù)的快速檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)待測樣本液和體細(xì)胞ATP釋放劑混合反應(yīng)，得到除體細(xì)胞ATP溶液；
2)將所述除體細(xì)胞ATP溶液和ATP發(fā)光試劑混合反應(yīng)30～60s，得到除游離ATP溶液；
3)將所述除游離ATP溶液和細(xì)菌ATP釋放劑混合反應(yīng)，得到熒光反應(yīng)液；
4)熒光檢測儀檢測所述熒光反應(yīng)液，得到熒光數(shù)據(jù)；
5)將所述熒光數(shù)據(jù)代入公式a中計算，得到待測樣本液中細(xì)菌數(shù)量；
其中，Y表示檢測得到的熒光數(shù)據(jù)，X表示細(xì)菌數(shù)量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述快速檢測方法，其特征在于，所述體細(xì)胞ATP釋放劑的體積為待測樣本液體積的2～5倍；
所述ATP發(fā)光試劑的體積為待測樣本液體積的1～3倍；
所述細(xì)菌ATP釋放劑的體積為待測樣本液體積的2～5倍。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述，其特征在于，所述待測樣本液的制備方法根據(jù)待測樣本的形態(tài)的差異采用不同方法處理：
當(dāng)待測樣本為固體時，用棉簽擦拭待檢測樣本的表面，將擦拭后的棉簽置于無菌純凈水中反復(fù)攪拌，得到固體待測樣品液；
當(dāng)待測樣本為氣體時，用空氣采樣裝置采樣，得到氣體待檢測樣品液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1～3任意一項所述快速檢測方法，其特征在于，所述快速檢測方法在熒光檢測系統(tǒng)中進(jìn)行；
所述熒光檢測系統(tǒng)包括熒光檢測容器和熒光檢測裝置；所述熒光檢測容器為上部開口的圓柱形容器；所述熒光檢測容器選用透明的材質(zhì)；所述熒光檢測容器可拆卸固定在熒光檢測裝置的底面；
所述熒光檢測裝置在靠近底面的側(cè)壁上設(shè)置有探測器，用于檢測熒光信號；所述熒光檢測裝置在設(shè)置探測器的對面?zhèn)缺谏显O(shè)施有反射鏡，用于增強(qiáng)熒光信號；所述熒光檢測裝置的上部開口處設(shè)置蓋體；所述蓋體和側(cè)壁均選擇不透光的材質(zhì)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述快速檢測方法，其特征在于，步驟1)中所述待測樣本液和體細(xì)胞ATP釋放劑混合，步驟2)中所述將所述除體細(xì)胞ATP溶液和ATP發(fā)光試劑混合，步驟3)中將所述除游離ATP溶液和細(xì)菌ATP釋放劑混合反應(yīng)的操作均在所述熒光檢測容器中進(jìn)行；所述熒光檢測容器為從熒光檢測容器中拆卸下來的狀態(tài)。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述快速檢測方法，其特征在于，步驟4)中所述熒光檢測裝置檢測所述熒光反應(yīng)液的操作將所述熒光檢測容器置于所述熒光檢測裝置中進(jìn)行檢測。
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