本發(fā)明涉及一種利用轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶及殼聚糖制備鐵蛋白?殼聚糖復合物的方法，步驟如下：所述方法以紅豆提取鐵蛋白為原料，利用轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶的催化作用，使殼聚糖結(jié)合于鐵蛋白上，通過凝膠過濾方法分離有效的結(jié)合組分，即得鐵蛋白?殼聚糖復合物，得到的鐵蛋白?殼聚糖復合物具有相較于鐵蛋白更高的穩(wěn)定性。本方法利用轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶催化殼聚糖共價結(jié)合于鐵蛋白外殼上，提高鐵蛋白的熱穩(wěn)定性及腸胃消化穩(wěn)定性，進而提高鐵蛋白的生物利用度和補鐵效率，該方法制得的鐵蛋白?殼聚糖復合物能夠應(yīng)用在食品添加劑、飼料、保健食品等行業(yè)中。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于食品技術(shù)領(lǐng)域，尤其是一種利用轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶及殼聚糖制備鐵蛋白-殼聚糖復合物的方法。

背景技術(shù)

鐵是人體所必需的營養(yǎng)元素，全球近一半人罹患鐵缺乏，嚴重的話會影響著人們的健康。缺鐵性貧血是當今世界發(fā)病率最高的營養(yǎng)性疾病之一。而傳統(tǒng)的補鐵制劑由于受到小分子螯合劑的干擾，導致補鐵效果不理想；同時也會對人體產(chǎn)生毒副作用而逐漸被禁止使用。因此尋找一種天然、無毒、生物可溶性的補鐵產(chǎn)品迫在眉睫。

鐵蛋白是生物中內(nèi)在鐵的主要存在形式，能以可溶的、無毒的、生物可利用的形式存儲大量的鐵原子(每分子鐵蛋白最多可容納4500個Fe原子)，而且可以調(diào)節(jié)細胞內(nèi)鐵的動態(tài)平衡。研究表明鐵蛋白是含有三價鐵離子的復合物，其儲存的鐵生物利用性較高，且不會引起毒副作用，是非常有效的鐵營養(yǎng)源。其中以大豆鐵蛋白為代表的植物鐵蛋白被認為是未來的一種天然安全的補鐵因子。在日常接觸的食物中，相較于其他鐵來源，豆科植物中鐵蛋白含量最為豐富，其鐵蛋白含量大約為50-70mg/kg，每分子鐵蛋白能夠容納約1800個三價鐵。因此，鐵蛋白是補鐵制劑開發(fā)的良好材料。其中以大豆種子鐵蛋白研究最多，大豆種子鐵蛋白被認為是未來一種新型的、天然的功能性補鐵因子。

現(xiàn)今國內(nèi)外對于鐵蛋白的研究主要集中于鐵蛋白體內(nèi)調(diào)節(jié)鐵的代謝平衡及鐵蛋白的獨特的納米空腔方面，但是在應(yīng)用方面受到很多的限制。例如，鐵蛋白作為一種蛋白組分，其理化性質(zhì)極易受到外界環(huán)境的影響，例如pH、溫度、離子強度等。鐵蛋白等電點在pH5.0左右，低酸性條件下，溶解度及穩(wěn)定性都很差，當食品為酸性體系時，鐵蛋白的使用就會受到限制。在腸胃中，鐵蛋白也非常不穩(wěn)定，容易被胰蛋白酶和胃蛋白酶降解，導致了鐵蛋白中鐵的生物利用度下降。因此，為改善鐵蛋白的一些功能特性，擴大鐵蛋白的應(yīng)用范圍，通過鐵蛋白改性顯得尤為重要。

利用多糖對鐵蛋白進行修飾的手段是一種良好的技術(shù)手段，越來越受到人們的關(guān)注。研究發(fā)現(xiàn)，蛋白質(zhì)多糖復合物可以提高蛋白質(zhì)的物理穩(wěn)定性、溶解性、抗菌性、抗氧化性等。殼聚糖是自然界唯一帶陽離子(游離-NH³⁺)的天然氨基多糖，其化學結(jié)構(gòu)由N-乙酰-2-氨基-2-脫氧-D-葡萄糖通過β-1,4糖苷鍵連接而成的直鏈氨基多糖，生物相容性好，成本低。轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(transglutaminase,TG)，是一種可催化轉(zhuǎn)酰胺基反應(yīng)的酶，它可以催化蛋白質(zhì)賴氨酸上的氨基和其他化合物上的酰胺基結(jié)合，從而導致蛋白質(zhì)與其他分子之間發(fā)生共價交聯(lián)，形成相應(yīng)的聚合產(chǎn)物。因此，通過轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶的催化作用，將殼聚糖催化結(jié)合于鐵蛋白外殼上，具有改進鐵蛋白結(jié)構(gòu)，提高鐵蛋白的功能特性，進而提高鐵蛋白中鐵的生物利用率的潛力。

通過檢索，尚未發(fā)現(xiàn)與本發(fā)明專利申請相關(guān)的專利公開文獻。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的在于針對鐵蛋白不穩(wěn)定的難題，克服現(xiàn)有技術(shù)的不足之處，提供一種利用轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶及殼聚糖制備鐵蛋白-殼聚糖復合物的方法，該方法利用轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶催化殼聚糖共價結(jié)合于鐵蛋白外殼上，提高鐵蛋白的熱穩(wěn)定性及腸胃消化穩(wěn)定性，進而提高鐵蛋白的生物利用度和補鐵效率，該方法制得的鐵蛋白-殼聚糖復合物能夠應(yīng)用在食品添加劑、飼料、保健食品等行業(yè)中。

本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：

一種利用轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶及殼聚糖制備鐵蛋白-殼聚糖復合物的方法，步驟如下：