本發明提供一種茶葉中提取和純化茶多酚方法，將茶葉粉碎經過粗提后得到茶多酚初提物，在經過茶多酚初步純化、茶多酚純化得到茶多酚，其提取率可以到達43%。本發明制備方法簡單，提取率高。

技術領域

本發明屬于茶多酚提取工藝，具體涉及一種茶葉中提取和純化茶多酚方法。

背景技術

茶多酚（Tea Polyphenols）是茶葉中多酚類物質的總稱，包括黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等。主要為黃烷醇（兒茶素）類，兒茶素占60~80%。類物質茶多酚又稱茶鞣或茶單寧，是形成茶葉色香味的主要成份之一，也是茶葉中有保健功能的主要成份之一。研究表明，茶多酚等活性物質具解毒和抗輻射作用，能有效地阻止放射性物質侵入骨髓，并可使鍶90和鈷60迅速排出體外，被健康及醫學界譽為“輻射克星”。

茶多酚作為生物抗氧化劑，已廣泛應用于食品加工、醫藥保健和日用化工等領域，具有廣闊的應用前景，是一類極具開發價值的天然產物，因此，開發高效、安全的茶多酚提取方法具有重要意義。

通過教育部查新工作站17個中文數據庫，12個英文數據庫檢索，通過與本發明方案最接近的已有技術：廣西克魯尼茶葉生物科技有限公司通過使用乙醇對茶葉中的茶多酚進行索氏提取，將所得索氏提取物使用15％正己烷和85％乙酸乙酯的混合溶液溶解，離心，大孔吸附樹脂等步驟從鮮茶葉中提取茶多酚。該技術所用有機溶劑多，但有機溶劑作用激烈，使茶多酚的結構會發生改變，導致茶多酚活性被抑制或喪失，因此該法提取的茶多酚的藥理生理活性還有進一步驗證。

發明內容

本發明的目的在于提供一種茶葉中提取和純化茶多酚方法。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種茶葉中提取和純化茶多酚方法，所述方法包括如下步驟：

1）將茶葉放進65℃烘干箱烘干，放到粉碎機中粉碎，過80目篩，稱取18g經過粉碎的茶葉，放進用濾紙折成的圓柱狀濾紙筒中，將茶葉和濾紙筒一并塞進索氏提取器的回流管中，加80%乙醇270ml到索氏瓶中，電熱套溫度為200℃，加熱時間60min；低壓濃縮，凍干茶多酚初提物；配乙酸乙酯混合液，具體方法為：蒸餾水：乙酸乙酯體積比＝1:3，之后用檸檬酸溶液調pH為４作為備用；

2）茶多酚初步純化：配茶多酚初提物溶液，濃度為0.05mg/ml，將茶多酚初提物溶液：乙酸乙酯混合液體積比＝1:3放進分液漏斗中，靜置30分鐘，待溶液分層后，收集下層沒有顏色的溶液（初步純化的茶多酚），低壓濃縮，冷凍干燥。

3）茶多酚純化：

(1)稱取上面茶多酚初步純化的樣品，配茶多酚溶液10mg/ml；

(2)裝樹脂之前，在玻璃層析柱內盛超純水，主要以防氣體進入樹脂內部，影響柱效；量取80mL預處理的NKA型大孔吸附樹脂，沿著玻棒將濕NKA型大孔樹脂裝入玻璃層析柱內，樹脂最后沉降到柱體積的2/3處，裝玻璃層析柱蓋子之前，要先啟動恒流泵，讓玻璃層析柱蓋子流出洗脫液，洗脫液為80%v/v乙醇；

（3）洗脫之前先要設定恒流泵轉速為50 rpm，收集器延時40秒，閾值為4MV，溢出滴數60滴；

（4）先用80%（v/v）乙醇以恒流泵轉速為50rpm，平衡柱子，直到氣泡排干凈，沒有上下波動成一直線為止；

（5）柱子平衡以后，用移液槍吸取濃度為10mg/ml茶多酚溶液2ml，沿柱壁小心加到樹脂表面；

（6）待樣品液面降至樹脂表面時，以恒流泵轉速為50rpm，用 80%（v/v)乙醇對樣品進行洗脫，收集從收集器廢液管流出的洗脫液，直至閾值低于2MV為止。