本發明公開了一種同時檢測四環素類藥物、氟喹諾酮類藥物和磺胺類藥物的試紙條及方法。該試紙條包括試紙和微孔試劑，所述試紙由樣品吸收墊、反應膜、吸水墊、保護膜、底板依次連接組成，所述反應膜上有三條檢測線和一條質控線，所述三條檢測線上分別包被有四環素類藥物半抗原?載體蛋白偶聯物、氟喹諾酮類藥物半抗原?載體蛋白偶聯物、磺胺類藥物半抗原?載體蛋白偶聯物，所述質控線上包被有羊抗鼠抗抗體；所述微孔試劑中凍干有四環素類藥物單克隆抗體?膠體金標記物、氟喹諾酮類藥物單克隆抗體?膠體金標記物和磺胺類藥物單克隆抗體?膠體金標記物。用本發明試紙條同時檢測四環素類藥物、氟喹諾酮類藥物和磺胺類藥物的方法簡便、快速、直觀、準確、便于攜帶、適用范圍廣、成本低、易推廣使用。

技術領域

本發明涉及一種同時檢測四環素類藥物、氟喹諾酮類藥物和磺胺類藥物的試紙條及方法，具體涉及一種用于同時檢測四環素類藥物、氟喹諾酮類藥物和磺胺類藥物的膠體金試紙條。

技術背景

四環素類藥物(Tetracyclines，TCs)具有廣譜高效的殺菌抗生功效，可作為預防和治療畜禽疾病的獸藥或作為促進畜禽生長的飼料添加劑而廣泛應用于可食性動物中。氟喹諾酮類藥物(Fluoroquinolones，FQs)是人工合成的含4-喹諾酮基本結構的抗菌藥，它通過抑制細菌DNA的合成而達到抑菌作用。磺胺類藥物(Sulfonamides，SAs)是一類具有對氨基苯磺酰胺結構的化學治療藥物，通過影響細胞核蛋白質的合成，抑制細菌的繁殖。由于TCs、FQs和SAs能抑制大多數革蘭氏陽性菌和陰性菌，性質穩定、價格低廉、使用方便，常以亞治療濃度的藥物作為飼料添加劑來預防疾病的發生，提高飼料的轉化率，促進動物生長。但長期用藥所產生的不良反應、在畜禽產品中的殘留、耐藥性的增加以及在環境中的生態效應等已引起國內外的廣泛關注。我國規定了牛奶中土霉素、四環素、金霉素殘留限量為100μg/L，牛、雞、豬、羊等動物組織中達氟沙星、二氟沙星、恩諾沙星(環丙沙星與恩諾沙星量之和)、沙拉沙星等喹諾酮類獸藥最高殘留限量為10～1900μg/kg，磺胺類獸藥總量的最高殘留限量為100μg/kg；歐盟規定在肌肉及牛奶中的四環素類化合物的總量不得超過100μg/kg，在腎臟、肝臟及雞蛋中分別不得超過600、300μg/kg及200μg/kg，在動物組織中達氟沙星、二氟沙星、恩諾沙星(環丙沙星與恩諾沙星量之和)、麻保沙星、沙拉沙星等喹諾酮類獸藥最高殘留限量為10～1900μg/kg，磺胺類獸藥的最高殘留限量與我國相同；而美國FDA明確規定四環素、土霉素、金霉素在動物肌肉組織中殘留總量不超過2μg/kg，牛奶中為300ng/g，肉中磺胺二甲嘧啶殘留量要小于100μg/kg，并且禁止在食源性動物中使用氟喹諾酮類獸藥。

目前，動物源性食品中TCs、FQs和SAs殘留的檢測手段主要包括微生物法、高效液相色譜法(HPLC)、酶聯免疫法(ELISA)、高效毛細管電泳法(HPCE)、放射免疫法和熒光光度法等。由于獸藥性質差別較大，現有的殘留分析一般按照化學結構類似的同族藥物來建立相應的檢測方法，而這些分析方法多集中在對單類抗生素的同時檢測上，而對多類抗生素同時檢測的方法研究較少，不能滿足目前獸藥種類不斷增加、分析通量不斷提高的需求。目前也有關于液相色譜-質譜聯用技術的研究，該方法靈敏度高，選擇性和特異性好，能對低濃度的樣品進行準確的定性確認，但樣品前處理過程復雜，儀器化程度高且價格昂貴，分析速度慢，僅適用于樣品的確證分析，不適合大批量樣品的篩選及現場檢測。與之相比，膠體金免疫層析法檢測時間短、穩定性好、操作簡便、無需其他儀器設備，結果判斷直觀可靠，適用于對現場大批量樣品進行快速篩選，對控制多類抗生素殘留具有重要意義。

發明內容

本發明的一個目的是提供一種同時檢測四環素類藥物、氟喹諾酮類藥物和磺胺類藥物的試紙條。