江南星蕨中七葉內酯的制備方法，主要包括對干燥的江南星蕨莖及葉，經過粉碎、乙醇溶液提取、乙酸乙酯、硅膠柱層析進行分離、MCl柱色譜分離、Sephadex LH?20柱色譜分離、中壓反相硅膠柱色譜分離、濃縮干燥后得到目標產物。實驗證明，體外抗乙肝病毒作用方面，本發明所得的江南星蕨中七葉內酯有效低毒，比陽性對照拉米夫定作用要好，在制備抗HBV藥物方面具有前景。

技術領域

本發明涉及抗HBV藥物，具體是江南星蕨中七葉內酯的制備方法及應用，特別是在制備抗HBV藥物方面的應用。

背景技術

目前對乙型肝炎的治療除抗病毒藥物外，還沒有找到其他其有效的方法，而當前的抗病毒藥物如拉米夫定雖然可以抑制HBV復制，但仍然不能徹底清除病毒，且存在藥物副作用。有數據顯示，全球超過4億人感染慢性HBV，每年大約有100萬人因此喪生，嚴重威脅到人類健康，因而需要進一步研發抗乙肝病毒藥物的新藥，從而解決乙肝病毒帶給人類的困擾。

七葉內酯，又稱秦皮乙素，屬香豆素類化合物，來源于蕓香科植物檸檬的葉，木犀科植物苦楊白蠟樹的樹皮及顛茄、曼陀羅、地黃植物等中。具有抗菌、抗炎、鎮靜等作用。

江南星蕨（Microsorium fortunei (Moore) Ching）又稱為大葉骨牌草、七星劍、旋雞尾，是水龍骨科（Polypodiaceae）星蕨屬的植物^[1]。大多分布在長江流域及以南各省區。江南星蕨全草及根莖都可入藥，具有清熱解毒、利濕、利尿、涼血止血、消腫止痛等功效，可以治療尿路感染、白帶、黃疸、痢疾、風濕關節痛、吐血、便血、跌打損傷、毒蛇咬傷等癥，其乙醇、丙酮、乙酸乙酯提取物均具有較強的抗氧化活性。

梁成欽等對江南星蕨莖和葉的化學成分進行分離純化和結構鑒定，方法：采用硅膠柱層析、反相硅膠柱層析、TLC和半制備HPLC等技術進行分離純化，并利用現代波譜技術進行化合物結構鑒定，結果：從江南星蕨莖和葉中分離得到11個化合物，分別鑒定為：槲皮素-3-0-蕓香糖苷(1)、山柰酚-3，7-O-α-L-二鼠李糖苷(2)、山柰酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(3)、迷迭香酸甲酯(4)、迷迭香酸(5)、尿苷(6)、polybotrin(7)、咖啡酸(8)、原兒茶酸(9)、七葉內酯(10)、5-羥甲基-2-呋喃甲醛(11)。結論：所有化合物均為首次從該植物中分離得到，化合物(2)～(6)、(10)、(11)為首次從該屬植物中分離得到（江南星蕨莖和葉的化學成分研究，《中藥材》，2017年40卷9期，2089-2092頁）。

未見七葉內酯以及江南星蕨中七葉內酯抗HBV方面的報道。

發明內容

為開發利用江南星蕨中分離得到的化學成分，本發明提供江南星蕨中七葉內酯的制備方法。

本發明的江南星蕨中七葉內酯的制備方法，包括：

S1：取干燥的江南星蕨莖及葉，粉碎；

S2：用30%~95%乙醇溶液提取；提取3~5次，溫度40~80度。

S3：減壓蒸餾至提取液乙醇含量低于3%；

S4：將蒸餾后的提取液，以乙酸乙酯萃取；

S5：萃取組分濃縮或濃縮干燥后用硅膠柱層析進行分離，先用氯仿洗脫硅膠體積的1~2倍，然后用氯仿/甲醇為2~9：1的混合洗脫劑進行洗脫，收集混合洗脫劑的洗脫組分；

S6：S5的洗脫組分濃縮或濃縮干燥后用MCl柱色譜分離，用60%~90%的甲醇溶液洗脫；

S7：S6所得組分濃縮或濃縮干燥后用Sephadex LH-20柱色譜分離，甲醇洗脫，得到5個組分Fr. B-1～Fr. B-5；