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[發明專利]一種制備谷胱甘肽合成酶系的方法有效

專利信息
申請號: 201810364570.7 申請日: 2018-04-23
公開(公告)號: CN108570458B 公開(公告)日: 2021-09-28
發明(設計)人: 姜華 申請(專利權)人: 齊魯工業大學
主分類號: C12N9/00 分類號: C12N9/00
代理公司: 暫無信息 代理人: 暫無信息
地址: 250353 山東*** 國省代碼: 山東;37
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 一種 制備 谷胱甘肽 合成 方法
【權利要求書】:

1.一種制備谷胱甘肽合成酶系的方法,其特征為,包括以下步驟:

(1)將產谷胱甘肽合成酶系的微生物培養,得細胞培養液,離心,制得菌體細胞,將菌體細胞重懸于去離子水中,制得細胞質量百分比濃度為25~35wt%的溶液,破碎細胞,得到細胞破碎液;

(2)在20~30℃下配制乳酸鈉水溶液,將聚丙二醇加入到乳酸鈉溶液中,在總體系中使聚丙二醇的質量百分比濃度為20~30wt%、乳酸鈉的質量百分比濃度為15~25wt%,混合均勻,制得聚丙二醇/乳酸鈉雙水相體系溶液;

(3)將步驟(1)制得的細胞破碎液與步驟(2)制得的聚丙二醇/乳酸鈉雙水相體系溶液按體積比(1~2):1混合均勻,靜置分相,制得乳酸鈉下相溶液和含有谷胱甘肽合成酶系的聚丙二醇上相溶液;

(4)向步驟(3)制得的聚丙二醇上相溶液中加入乳酸鈉,使乳酸鈉在總體系中的質量濃度為8~12wt%,混合均勻,靜置分相,制得乳酸鈉下相溶液和含有谷胱甘肽合成酶系的聚丙二醇上相溶液;

(5)向步驟(4)制得的聚丙二醇上相溶液中加入乳酸鈉,使乳酸鈉在總體系中的質量濃度為6~10wt%,調溶液pH值為7.5~8.5,混合均勻,靜置分相,制得含有谷胱甘肽合成酶系的乳酸鈉下相溶液和聚丙二醇上相溶液;

(6)用超濾膜對步驟(5)制得的乳酸鈉溶液過濾,收集截留液,冷凍干燥,制得谷胱甘肽合成酶系產品;

所述步驟(2)、(3)、(4)、(5)中的聚丙二醇的數均分子量為500,

所述步驟(1)中,破碎細胞采用高壓勻漿機,工作壓力為50~60MPa、溫度為5~10℃,

所述步驟(6)中,超濾膜的截留分子量為40000~50000Dal,工作壓力為0.1~0.2MPa、溫度為20~25℃。

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