本發明提供了一種聯合檢測CRP、PCT和SAA的試劑盒及其制備方法，該試劑盒包括：分別用磁微粒標記的C反應蛋白單克隆抗體溶液、降鈣素原單克隆抗體溶液和血清淀粉樣蛋白A單克隆抗體溶液；包被有C反應蛋白單克隆抗體的載體、包被有降鈣素原單克隆抗體的載體、包被有血清淀粉樣蛋白A單克隆抗體的載體和包被有羊抗鼠抗體的載體；硝酸纖維素膜試紙條。制備方法包括：用磁微粒分別標記的C反應蛋白單克隆抗體、降鈣素原單克隆抗體和血清淀粉樣蛋白A單克隆抗體；分別用C反應蛋白單克隆抗體、降鈣素原單克隆抗體、血清淀粉樣蛋白A單克隆抗體和羊抗鼠抗體包被載體；分裝并組裝為成品。本試劑盒能同時快速、定量準確檢測三種標志物。

技術領域

本發明涉及生物醫學領域，特別涉及一種聯合檢測CRP、PCT和SAA的試劑盒及其制備方法。

背景技術

C－反應蛋白（C-neactveprotein,簡稱CRP），早于1930年發現，是一種能與肺炎球菌C多糖體反應形成復合物的急性時相反應蛋白。并且在機體受到感染或組織損傷時血漿中一些急劇上升的蛋白質（急性蛋白），激活補體和加強吞噬細胞的吞噬而起調理作用，清除入侵機體的病原微生物和損傷，壞死，凋亡的組織細胞。近年來，由于檢測技術的更新，測定CRP的快速、簡便和可靠的方法已迅速建立。使CRP在臨床應用領域大大增加，其在醫學上的價值正得到廣泛驗正和承認。CRP在炎癥開始數小時就升高，48小時即可達峰值，隨著病變消退、組織、結構和功能的恢復降至正常水平。此反應不受放療、化療、皮質激素治療的影響。因此，CRP的檢測在臨床應用相當廣泛，包括急性感染性疾病的診斷和鑒別診斷，手術后感染的監測；抗生素療效的觀察；病程檢測及預后判斷等。

降鈣素原（Procalcitonin，PCT）是一種蛋白質，在正常及健康的個體中，其血清濃度極低，僅為10-50pg/ml，一般方法檢測不到。在全身性細菌、真菌及寄生蟲感染，系統炎癥反應綜合癥、敗血癥、急慢性肺炎、急性胰腺炎、活動性肝炎、創傷等患者的血清PCT水平異常增高，其濃度科大正常水平的幾倍甚至上萬倍；在病毒感染，自身免疫性疾病，器官移植排除反應等患者的血清濃度不增高或輕微增高。這就決定了PCT的高度特異性，因此可用于此類疾病的鑒別診斷，在全身性細菌感染和膿毒癥輔助鑒別診斷、預后判斷、療效觀察等方面有很高的臨床價值，可廣泛用于ICU病房、血液科、外科、內科、器官移植科、治療實驗室等。

血清淀粉樣蛋白A（Serum amyloid A，SAA)是一種急性時限反應蛋白，屬于載脂蛋白家族中的異質類蛋白質，相對分子量約12 000。在急性時限反應中，經IL-1、IL-6和TNF刺激，SAA在肝臟中由被激活的巨噬細胞和纖維母細胞合成，可升高到最初濃度的100-1000倍，但半衰期極短，只有50分鐘左右。血清淀粉樣蛋白 A 與高密度脂蛋白 (HDL)有關，它能在炎癥期間調節高密度脂蛋白的代謝。血清淀粉樣蛋白 A 一個特別重要的特性是其降解產物能以淀粉樣蛋白 A (AA) 原纖維的方式沉積在不同的器官中，在慢性炎癥疾病中這是一種嚴重的并發癥。

現有技術檢測血清學指標的方法主要包括放射性同位素免疫分析、生化免疫比濁的方法分析、膠體金免疫層析、酶聯免疫吸附方法和化學發光免疫分析。放射免疫分析須用¹²⁵I等放射性元素標記，檢測設備復雜，其放射性核素的半衰期短，不能長期保存，測定結果不穩定，同時也給實驗操作人員帶來了放射性傷害。免疫比濁的方法，該方法檢測靈敏度低，溶液受環境的影響。膠體金免疫層析法來檢測，快速，便捷，單人份操作，但是缺點是只能實現半定量，只能指示一個大概范圍，無法實現精確定量。酶聯免疫分析檢測靈敏度不夠高，檢測范圍窄，影響因素較多，易造成假陰性和假陽性。化學發光免疫分析檢測靈敏度較高，但需要大型全自動的儀器，對實驗室及相關實驗人員要求高，收費較高等缺點。

由上可知，聯合檢測CRP、PCT和SAA等炎癥標志物，對于感染、膿毒癥等的早期快速精確診斷、病程監測、療效跟蹤等均具有重要支撐作用。然而，目前尚缺少可以同時快速、定量準確檢測上述三種指標的聯檢試劑。

發明內容