[發(fā)明專利]一種革蘭氏染色質(zhì)控片及其制作方法和應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810163179.0 | 申請日: | 2018-02-26 |
| 公開(公告)號: | CN108359620B | 公開(公告)日: | 2020-09-01 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 方舒;張永靜;鐘思夏;陶露;徐虹;高玉榮 | 申請(專利權(quán))人: | 巢湖學(xué)院 |
| 主分類號: | C12N1/20 | 分類號: | C12N1/20;C12Q1/14;C12Q1/10;C12R1/19;C12R1/445 |
| 代理公司: | 安徽知問律師事務(wù)所 34134 | 代理人: | 代群群 |
| 地址: | 238000 安*** | 國省代碼: | 安徽;34 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 革蘭氏 染色質(zhì) 及其 制作方法 應(yīng)用 | ||
本發(fā)明公開了一種革蘭氏染色質(zhì)控片及其制作方法和應(yīng)用,屬于染色技術(shù)領(lǐng)域,其解決了現(xiàn)有技術(shù)中臨床和實驗上對細(xì)菌進(jìn)行革蘭氏染色時由于無法準(zhǔn)確判斷染色結(jié)果的顏色致使容易出現(xiàn)“假陽”和“假陰”現(xiàn)象的問題。本發(fā)明提供一種革蘭氏染色質(zhì)控片及其制作方法和應(yīng)用,革蘭氏染色質(zhì)控片包括載玻片、質(zhì)控菌區(qū)、樣品菌區(qū)和保護(hù)罩,該質(zhì)控片可以有效避免臨床和實驗上對細(xì)菌進(jìn)行革蘭氏染色時出現(xiàn)“假陽”和“假陰”現(xiàn)象,確保革蘭氏染色結(jié)果的正確性。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于染色技術(shù)領(lǐng)域,具體地說,涉及一種革蘭氏染色質(zhì)控片及其制作方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)
現(xiàn)有技術(shù)中,臨床、實驗上對細(xì)菌進(jìn)行革蘭氏染色容易出現(xiàn)“假陽”和“假陰”現(xiàn)象,通常是由于革蘭氏染色試劑的質(zhì)量或者染色中時間處理不當(dāng)導(dǎo)致,例如脫色時間過長容易出現(xiàn)“假陰”,脫色時間過短容易出現(xiàn)“假陽”。在臨床上,治療革蘭氏陽性菌與治療革蘭氏陰性菌所使用的抗生素都是不一樣的,所以染色結(jié)果的正確性對醫(yī)生合理開藥也是影響重大的。
現(xiàn)有方法中通常采用下列方式來確保革蘭氏染色實驗的正確性:(1)對樣品菌進(jìn)行簡單染色(美藍(lán)、結(jié)晶紫或堿性復(fù)紅等染劑處理),鏡檢該樣品菌的形態(tài),樣品菌的形態(tài)可以是球狀、或者桿狀、或者螺旋狀、或者其它特殊形態(tài),但是只能是其中一種形態(tài);(2)若鏡檢后發(fā)現(xiàn)樣品菌是球狀,那么在實驗室里需要培養(yǎng)大腸桿菌;若鏡檢后發(fā)現(xiàn)樣品菌是桿狀或螺旋狀,需要在實驗室里培養(yǎng)金黃色葡萄球菌;(3)若樣品菌是球狀,那么樣品菌與大腸桿菌在載玻片的同一位置進(jìn)行混合涂片、干燥、固定、革蘭氏染色直至鏡檢,鏡檢時,先觀察混合涂片區(qū)域的大腸桿菌是否為紅色,若是紅色,說明本次革蘭氏染色結(jié)果是正確的,再看混合涂片區(qū)域的樣品菌,樣品菌是紅色,那就是陰性,樣品菌是紫色或藍(lán)紫色,那就是陽性;(4)若樣品菌是桿狀,那么樣品菌需要與金黃色葡萄球菌進(jìn)行混合涂片;(5)上述所說的混合涂片區(qū)域是同時含有樣品菌和大腸桿菌(或者金黃色葡萄球菌)的。但上述的傳統(tǒng)方法比較費時,需要每次對樣品菌簡單染色進(jìn)行鏡檢,知道什么形態(tài)后,才能決定培養(yǎng)大腸桿菌或是金黃色葡萄球菌。
同時傳統(tǒng)上的革蘭氏染色多采用初染、媒染、脫色和復(fù)染的四步法,目前為止大多數(shù)學(xué)者對傳統(tǒng)的革蘭氏染色四步法進(jìn)行了染色過程的優(yōu)化調(diào)整,例如對染色時間和脫色時間的優(yōu)化篩選,或者對染色試劑進(jìn)行改進(jìn);但上述的方法都需要做大量的對比參照才能實現(xiàn)染色結(jié)果的準(zhǔn)確,對于大批量未知菌的染色鑒定,這種方式效率低且錯誤率高,為了保證染色結(jié)果的正確性則需要每組未知菌都需要培養(yǎng)革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌的模式菌株,增加了工作量。
發(fā)明內(nèi)容
1、要解決的問題
針對現(xiàn)有技術(shù)中臨床和實驗上對細(xì)菌進(jìn)行革蘭氏染色時由于無法準(zhǔn)確判斷染色結(jié)果的顏色致使容易出現(xiàn)“假陽”和“假陰”現(xiàn)象的問題,本發(fā)明提供一種革蘭氏染色質(zhì)控片及其制作方法和應(yīng)用。它可以有效避免臨床和實驗上對細(xì)菌進(jìn)行革蘭氏染色時出現(xiàn)“假陽”和“假陰”現(xiàn)象,確保革蘭氏染色結(jié)果的正確性。
2、技術(shù)方案
為解決上述問題,本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案。
一種革蘭氏染色質(zhì)控片的制作方法,包括以下步驟:
(1)準(zhǔn)備載玻片并在載玻片的一端為標(biāo)記區(qū),用于待檢測樣品菌種的信息;
(2)在載玻片上設(shè)置質(zhì)控菌區(qū)和樣品菌區(qū),且質(zhì)控菌區(qū)和樣品菌區(qū)及標(biāo)記區(qū)互不重疊,同時樣品菌區(qū)可以設(shè)置多個,實現(xiàn)同一載玻片上多個樣品菌的處理,從而提高了效率;
(3)準(zhǔn)備防水膠布和雙面防水膠片,并將防水膠布和雙面防水膠片黏合在一起后;接著將防水膠布和雙面防水膠片進(jìn)行貫通打孔,再將防水膠布的一面貼合在質(zhì)控菌區(qū)上并形成凸起邊緣,質(zhì)控菌區(qū)經(jīng)紫外照射處理后,最后將防水貼紙跟雙面防水膠片的一面貼合,制得保護(hù)罩;
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