[發明專利]一種用于治療肺血栓栓塞癥的以D-二聚體單克隆抗體為靶向裝置的載尿激酶微泡有效
| 申請號: | 201711148986.7 | 申請日: | 2017-11-17 |
| 公開(公告)號: | CN107823642B | 公開(公告)日: | 2020-12-15 |
| 發明(設計)人: | 章銳鋒;梁黎;馬國鋒;許曉玲 | 申請(專利權)人: | 浙江大學醫學院附屬邵逸夫醫院 |
| 主分類號: | A61K49/22 | 分類號: | A61K49/22;A61K41/00;A61K9/127;A61K38/49;A61K47/24;A61K47/42;A61P7/02;A61P11/00 |
| 代理公司: | 杭州杭誠專利事務所有限公司 33109 | 代理人: | 尉偉敏 |
| 地址: | 310016 浙*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
| 權利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 用于 治療 血栓 栓塞 二聚體 單克隆抗體 靶向 裝置 尿激酶 | ||
1.一種用于治療肺血栓栓塞癥的以D-二聚體單克隆抗體為靶向裝置的載尿激酶微泡,其特征在于:所述微泡為磷脂質地,微泡負載有溶栓藥物,微泡表面附有生物素化D-二聚體單克隆抗體;
所述載尿激酶微泡的制備方法如下:
1)超聲微泡的制備:取摩爾比為80-90:8-12:3-5的二硬脂酰基磷脂酰膽堿、1,2-棕櫚酰磷脂酰甘油、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-PEG2000,溶解于三氯甲烷中并在渦旋混合器上混勻;用干燥的氮氣除去三氯甲烷,于真空烘箱中干燥2 h以上;加入脫氣的Tris緩沖溶液,得到2.5-3.5mg/mL的磷脂溶液;將磷脂溶液加熱至相變溫度,用水浴超聲振蕩器使溶液分散至透明,分裝入的西林瓶中;將瓶中的空氣置換成全氟丙烷,用鋁塑蓋和橡膠塞封口,再用機械振蕩器振蕩40-50s,制得超聲微泡;
2)載藥微泡的制備:將所述超聲微泡與尿激酶混合,孵育1.5-2.5h,低速離心,洗滌,制得載藥微泡;
3)生物素化抗體的制備:將鼠抗人D-二聚體單克隆抗體透析,加入PLTK微孔濾膜管中,再向管中加入的N-羥基琥珀酰亞 胺生物素酯,孵育后離心,加入PBS,混勻后再次離心,去除外管濾液,制得生物素化D-二聚體單克隆抗體;
4)載藥微泡與抗體的鏈接:將載藥微泡加入到過量的鏈親和素中,低溫振蕩孵育25-35min后,反復低溫、低速離心洗滌;加入步驟3)制備的生物素化D-二聚體單克隆抗體,再經25-35 min低溫孵育,反復低溫、低速離心洗滌,制得成品。
2.如權利要求1所述的一種用于治療肺血栓栓塞癥的以D-二聚體單克隆抗體為靶向裝置的載尿激酶微泡,其特征在于,所述溶栓藥物為尿激酶。
3.如權利要求1所述的一種用于治療肺血栓栓塞癥的以D-二聚體單克隆抗體為靶向裝置的載尿激酶微泡,其特征在于,所述微泡的粒徑為1.2-2.2微米。
4.如權利要求1所述的一種用于治療肺血栓栓塞癥的以D-二聚體單克隆抗體為靶向裝置的載尿激酶微泡 ,其特征在于,步驟1)中,所述Tris緩沖溶液中含有體積分數為8-12%的甘油和體積分數為8-12%丙二醇。
5.如權利要求1所述的一種用于治療肺血栓栓塞癥的以D-二聚體單克隆抗體為靶向裝置的載尿激酶微泡,其特征在于,步驟1)中,所述磷脂溶液的相變溫度為55-60℃。
6.如權利要求1所述的一種用于治療肺血栓栓塞癥的以D-二聚體單克隆抗體為靶向裝置的載尿激酶微泡,其特征在于,步驟2)中,所述尿激酶與超聲微泡的用量比為10000-100000U/mL;低速離心的速率為280-320xg,離心時間為2-4min,洗滌次數為2-4次。
7.如權利要求1所述的一種用于治療肺血栓栓塞癥的以D-二聚體單克隆抗體為靶向裝置的載尿激酶微泡,其特征在于,步驟2)中制得載藥微泡后,在400倍的光鏡下觀察載藥微泡的大小、形態及分布,以分布均勻、分散性好及未見明顯聚集的微泡為合格;若制得微泡大小相差巨大,分布不均,有明顯聚集,則重復步驟1)和步驟2)直至符合要求。
8.如權利要求1所述的一種用于治療肺血栓栓塞癥的以D-二聚體單克隆抗體為靶向裝置的載尿激酶微泡,其特征在于,步驟3)中,透析后的鼠抗人D-二聚體單克隆抗體與N-羥基琥珀酰亞 胺生物素酯的體積用量比為1:1,添加的N-羥基琥珀酰亞 胺生物素酯的濃度為1mg/mL,孵育時間為3-5h。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息,商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于浙江大學醫學院附屬邵逸夫醫院,未經浙江大學醫學院附屬邵逸夫醫院許可,擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作,請聯系【客服】
本文鏈接:http://www.17sss.com.cn/pat/books/201711148986.7/1.html,轉載請聲明來源鉆瓜專利網。





