[發明專利]一種重組抗TNF-α全人源單克隆抗體的純化方法在審
| 申請號： | 201711146780.0 | 申請日： | 2017-11-17 |
| 公開（公告）號： | CN108101987A | 公開（公告）日： | 2018-06-01 |
| 發明（設計）人： | 鄭天柱 | 申請（專利權）人： | 安徽未名生物醫藥有限公司 |
| 主分類號： | C07K16/24 | 分類號： | C07K16/24;C07K1/18 |
| 代理公司： | 合肥市長遠專利代理事務所(普通合伙) 34119 | 代理人： | 楊霞;翟攀攀 |
| 地址： | 230000 安徽省合肥市巢湖經濟*** | 國省代碼： | 安徽;34 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 平衡緩沖液 單克隆抗體 醋酸鹽緩沖液 磷酸鹽緩沖液 淋洗 洗脫 陽離子交換色譜 混合液 抗體 上樣 對抗 平衡 | ||
1.一種重組抗TNF-α全人源單克隆抗體的純化方法，其特征在于，包括對抗體進行陽離子交換色譜洗脫，其過程具體包括：平衡上樣后，首先采用平衡緩沖液1第一次淋洗，接著采用平衡緩沖液2第二次淋洗，接著采用平衡緩沖液2和平衡緩沖液3的混合液第三次淋洗，最后進行洗脫獲得純化抗體；其中，平衡緩沖液1為磷酸鹽緩沖液或醋酸鹽緩沖液，平衡緩沖液2為磷酸鹽緩沖液或醋酸鹽緩沖液，平衡緩沖液3為磷酸鹽緩沖液或醋酸鹽緩沖液。
2.根據權利要求1所述重組抗TNF-α全人源單克隆抗體的純化方法，其特征在于，第一次淋洗中，平衡緩沖液1中磷酸根離子或醋酸根離子的濃度為20-40mmol/L；優選地，第一次淋洗中，平衡緩沖液1的pH值為4.8-5.2。
3.根據權利要求1或2所述重組抗TNF-α全人源單克隆抗體的純化方法，其特征在于，第一次淋洗中，平衡緩沖液1中還含有氯化鈉；優選地，所述氯化鈉的濃度為30-70mmol/L。
4.根據權利要求1-3任一項所述重組抗TNF-α全人源單克隆抗體的純化方法，其特征在于，第二次淋洗中，平衡緩沖液2中磷酸根離子或醋酸根離子的濃度為30-70mmol/L；優選地，第二次淋洗中，平衡緩沖液2的pH值為5.8-6.6。
5.根據權利要求1-4任一項所述重組抗TNF-α全人源單克隆抗體的純化方法，其特征在于，第三次淋洗中，平衡緩沖液2中磷酸根離子或醋酸根離子的濃度為30-70mmol/L；優選地，第三次淋洗中，平衡緩沖液2的pH值為5.8-6.6；優選地，第三次淋洗中，平衡緩沖液3中磷酸根離子或醋酸根離子的濃度為30-70mmol/L；優選地，第三次淋洗中，平衡緩沖液3的pH值為6.8-7.6。
6.根據權利要求1-5任一項所述重組抗TNF-α全人源單克隆抗體的純化方法，其特征在于，第三次淋洗中，平衡緩沖液2與平衡緩沖液3的體積比為3-7：2-3。
7.根據權利要求1-6任一項所述重組抗TNF-α全人源單克隆抗體的純化方法，其特征在于，第一次淋洗的淋洗體積不少于3個柱體積；優選地，第二次淋洗的淋洗體積不少于3個柱體積。
8.根據權利要求1-7任一項所述重組抗TNF-α全人源單克隆抗體的純化方法，其特征在于，第三次淋洗采用等度洗脫的方式淋洗；優選地，第三次淋洗采用等度洗脫的方式淋洗中，洗脫體積為5-9個柱體積。
9.根據權利要求1-8任一項所述重組抗TNF-α全人源單克隆抗體的純化方法，其特征在于，采用平衡緩沖液3進行洗脫獲得純化抗體；優選地，在采用平衡緩沖液3進行洗脫的過程中，平衡緩沖液3中磷酸根離子或醋酸根離子的濃度為30-70mmol/L；優選地，在采用平衡緩沖液3進行洗脫的過程中，平衡緩沖液3的pH值為6.8-7.6。
10.根據權利要求1-9任一項所述重組抗TNF-α全人源單克隆抗體的純化方法，其特征在于，洗脫的起點為采用平衡緩沖液2和平衡緩沖液3的混合液淋洗結束后；優選地，洗脫的終點為紫外檢測器檢測值達到10-40mAU/m。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于安徽未名生物醫藥有限公司，未經安徽未名生物醫藥有限公司許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.17sss.com.cn/pat/books/201711146780.0/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
- 上一篇：抗VEGF抗體
- 下一篇：針對CD16的全人源單域抗體、其抗原結合片段及應用
