[發明專利]一種生產反式-4-羥基-L-脯氨酸的方法有效
| 申請號： | 201710661945.1 | 申請日： | 2017-08-04 |
| 公開（公告）號： | CN107674863B | 公開（公告）日： | 2019-03-05 |
| 發明（設計）人： | 孫際賓;劉嬌;鄭平;王興初;周文娟;馬延和 | 申請（專利權）人： | 中國科學院天津工業生物技術研究所 |
| 主分類號： | C12N9/02 | 分類號： | C12N9/02;C12N1/21;C12P13/24;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海一平知識產權代理有限公司 31266 | 代理人： | 陳詳;崔佳佳 |
| 地址： | 300308 天津*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 脯氨酸 反式 羥基 反式- 4 -羥基- L -脯氨酸 生產菌株 多肽 生產 下游產物 低成本 構建 菌株 前體 | ||
1.一種多肽在生產反式-4-羥基-L-脯氨酸或以反式-4-羥基-L-脯氨酸為前體的下游產物中的用途，其特征在于，所述多肽是：
(a1)SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的多肽，并且具有催化L-脯氨酸生成反式-4-羥基-L-脯氨酸的功能；或
(b1)從SEQ ID NO:1所示氨基酸序列多肽衍生的多肽，由SEQ ID NO:1所示氨基酸序列在C端帶有6個his標簽而形成，并且具有(a1)所述多肽的功能。
2.如權利要求1所述的用途，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
3.如權利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述多肽用于生產反式-4-羥基-L-脯氨酸。
4.如權利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述以反式-4-羥基-L-脯氨酸為前體的下游產物是碳青霉烯類抗生素側鏈。
5.一種反式-4-羥基-L-脯氨酸的生產菌株，其特征在于，所述菌株表達以下多肽：
(a1)SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的多肽，并且具有催化L-脯氨酸生成反式-4-羥基-L-脯氨酸的功能；或
(b1)從SEQ ID NO:1所示氨基酸序列多肽衍生的多肽，由SEQ ID NO:1所示氨基酸序列在C端帶有6個his標簽而形成，并且具有(a1)所述多肽的功能。
6.如權利要求5所述的生產菌株，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
7.如權利要求5所述的生產菌株，其特征在于，所述的生產菌株是細菌。
8.如權利要求5所述的生產菌株，其特征在于，所述的生產菌株選自下組：大腸桿菌(E.coli)、谷氨酸棒桿菌(Corynebacterium glutamicum)、黃色短桿菌(Brevibacteriumflavum)、粘質沙雷氏菌(Serratia marcescens)、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)。
9.如權利要求5所述的生產菌株，其特征在于，所述反式-4-羥基-L-脯氨酸生產菌株能夠在≥35℃的條件下生產反式-4-羥基-L-脯氨酸。
10.如權利要求5所述的生產菌株，其特征在于，所述反式-4-羥基-L-脯氨酸生產菌株能夠在≥35℃的條件下生產反式-4-羥基-L-脯氨酸，且生產強度提高0.5倍。
11.如權利要求5所述的生產菌株，其特征在于，所述反式-4-羥基-L-脯氨酸生產菌株能夠在≥35℃的條件下生產反式-4-羥基-L-脯氨酸，且生產強度提高1倍。
12.如權利要求5所述的生產菌株，其特征在于，所述反式-4-羥基-L-脯氨酸生產菌株能夠在≥35℃的條件下生產反式-4-羥基-L-脯氨酸，且生產強度提高1.5倍。
13.如權利要求5所述的生產菌株，其特征在于，所述反式-4-羥基-L-脯氨酸生產菌株能夠在≥35℃的條件下生產反式-4-羥基-L-脯氨酸，且生產強度提高2倍。
14.如權利要求5所述的生產菌株，其特征在于，所述反式-4-羥基-L-脯氨酸生產菌株能夠在37℃的條件下生產反式-4-羥基-L-脯氨酸。
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