[發(fā)明專利]一種檢測(cè)免疫性血小板減少癥血小板自身抗體的方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201710608977.5 | 申請(qǐng)日: | 2017-07-25 |
| 公開(公告)號(hào): | CN107389939A | 公開(公告)日: | 2017-11-24 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 冀學(xué)斌;張麗萍;李秋環(huán) | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 冀學(xué)斌 |
| 主分類號(hào): | G01N33/577 | 分類號(hào): | G01N33/577 |
| 代理公司: | 暫無(wú)信息 | 代理人: | 暫無(wú)信息 |
| 地址: | 250012 山東省濟(jì)南市歷下區(qū)*** | 國(guó)省代碼: | 山東;37 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說(shuō)明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 檢測(cè) 免疫性 血小板 減少 自身抗體 方法 | ||
1.一種檢測(cè)免疫性血小板減少癥血小板自身抗體的方法,其特征在于它采用如下步驟:
(1)制備備抗體包被多孔板,每孔內(nèi)加入羊抗鼠單克隆抗體(一抗),過(guò)夜孵育后,加入抗血小板單克隆抗體,室溫孵育備用;
(2)離心機(jī)分離患者血清或血小板表面的血小板特異性抗體,加入正常人O型血小板,室溫孵育,血小板溶解液(含蛋白酶抑制劑)溶解血小板,制成上清液;
(3)將上述上清液加入步驟1制備好的抗體包被多孔板,室溫孵育,再加入堿性磷酸酶標(biāo)記的羊抗人單克隆抗體(二抗),室溫孵育;
(4)加PNPP/底物緩沖劑溶液,室溫孵育至顯色,觀察結(jié)果;
(5)所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)用配對(duì)T檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測(cè)免疫性血小板減少癥血小板自身抗體的方法,其特征在于:先將O型正常人血小板與患者待測(cè)血清或血小板洗脫液反應(yīng),洗滌后裂解血小板,離心取上清稀釋后待用,在抗鼠抗體包被的多孔板中,先加入抗血小板膜糖蛋白單克隆抗體(鼠抗人單克隆抗體)再加入稀釋上清液,然后加入酶標(biāo)二抗和底物,從而避免人抗鼠抗體與鼠單克隆抗體直接結(jié)合引起的干擾,避免假陽(yáng)性的產(chǎn)生。
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