[發明專利]一種基因VII型新城疫病毒弱毒株的構建方法有效
| 申請號: | 201710388557.0 | 申請日: | 2017-05-27 |
| 公開(公告)號: | CN107418973B | 公開(公告)日: | 2020-11-06 |
| 發明(設計)人: | 李明義;孫化露;金紅巖;李思菲;于澤坤;畢云英;劉陽;單學強;欒志舫;馬禮照;李朝陽 | 申請(專利權)人: | 山東信得科技股份有限公司;青島信得藥業有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/85 | 分類號: | C12N15/85;C12N7/00;C12R1/93 |
| 代理公司: | 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 湯東鳳 |
| 地址: | 262200 山東省濰坊市*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 基因 vii 新城 疫病 毒弱毒株 構建 方法 | ||
1.一種構建VII型新城疫病毒弱毒株的方法,其特征在于,所述的方法包括如下的步驟:
構建表達T7 RNA聚合酶的細胞系、
提供基因VII型新城疫病毒拯救過程中需要的三個輔助重組質粒和一個全基因組重組載體,三個輔助重組質粒分別包含新城疫病毒的NP蛋白、P蛋白和L蛋白基因;其中P蛋白的237位和240位的氨基酸分別為T和I;
所述的P蛋白的氨基酸序列為SEQ ID NO:1;
將三個輔助重組質粒和一個全基因組重組載體轉入到表達T7 RNA聚合酶的細胞系中,培養獲得基因VII型新城疫病毒弱毒株;
所獲得基因VII型新城疫病毒弱毒株的保藏編號為CCTCC NO:V201710。
2.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述的細胞系,是將表達T7 RNA聚合酶的基因與載體PCI-neo連接后轉染DF1細胞構建的。
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