[發(fā)明專利]一種提高頭孢菌素C酰化酶活性的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710225603.5 | 申請日： | 2017-04-07 |
| 公開（公告）號： | CN108690849A | 公開（公告）日： | 2018-10-23 |
| 發(fā)明（設計）人： | 余少文;蒙秋平;謝寧;胡萍;潘慶;湯新 | 申請（專利權）人： | 深圳大學 |
| 主分類號： | C12N15/70 | 分類號： | C12N15/70;C12N9/80;C12R1/19 |
| 代理公司： | 深圳市德錦知識產(chǎn)權代理有限公司 44352 | 代理人： | 黃萍 |
| 地址： | 518000 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 頭孢菌素C 酰化酶 大腸桿菌菌株 轉化子 卡那霉素抗性基因 酰化酶基因 表達載體 雙缺陷型 制備 誘導 攜帶 轉化 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種提高頭孢菌素C酰化酶活性的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
(1)制備卡那霉素抗性基因和ptsG基因雙缺陷型的大腸桿菌菌株；
(2)將攜帶頭孢菌素C酰化酶基因的表達載體轉化所述大腸桿菌菌株，獲得轉化子；
(3)培養(yǎng)并誘導所述轉化子表達頭孢菌素C酰化酶。
2.一種培養(yǎng)如權利要求1所述方法中轉化子的培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基包括以下配方：1％胰蛋白胨，0.5％酵母提取物，1％NaCl，0.3％甘油，PH為8.0。
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述大腸桿菌為大腸桿菌BL21(DE3)。
4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2所述攜帶頭孢菌素C酰化酶基因的表達載體選自為pET-28a-CPCAcy、pACYCDuet-1-CPCAcy、pETDuet-1-CPCAcy和pRSFDuet-1-CPCAcy。
5.如權利要求4所述的方法，其特征在于，所述表達載體為pACYCDuet-1-CPCAcy。
6.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2所述轉化選用化學轉化法。
7.如權利要求2所述的培養(yǎng)基，其特征在于，所述PH8.0使用的是磷酸鹽緩沖液。
8.如權利要求1所述的方法在提高頭孢菌素C酰化酶活性中的應用。
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