技術領域

本發明涉及一種植物組織培養方法，具體涉及一種利用抑菌培養基培育茉莉花的組培方法，屬生物技術領域。

背景技術

茉莉花系木樨科素馨屬植物，學名為Jasminum sambac(Linn.)Aiton，原產于印度、波斯灣等地區。我國的茉莉花種植面積約占世界種植面積的三分之二，鮮花產量居世界首位。由于茉莉花不僅是裝飾、觀賞的佳品，還具有很高的經濟價值。除可供窨制花茶外，還可提取芳香油作為香料，茉莉花香的主要成分是茉莉酮，香質純正優雅，風味殊勝，故為我國香料工業調制茉莉型香精的主要原料，又是茉莉花茶的花源。用茉莉花窨制的花茶，香氣清雅、鮮靈而芬芳，茶湯醇厚、濃郁而不濁，在國內外享有盛名。用茉莉花提取的茉莉油，又是貴重的日用化工原料。還可制作洗眼藥，醫治結膜炎等。

茉莉花傳統是以扦插繁殖，繁殖方法簡便。但是，對于一些優良單株或瀕危品種，由于母株有限，可供扦插的枝條很少，難于在短時間內達到大量繁殖的目的。通過茉莉花組織培養，一方面可以不受季節影響，在短時間內達到大量繁殖的目的，從而實現規模化繁殖；另一方面，可以在保存其原有的優良性狀的基礎上，實現茉莉花的種質資源保存、提純復壯和轉基因研究等。

茉莉花組織培養的成本主要包括組培苗生產所需的培養基、設施設備、供電成本、耗材和人工成本。常規的茉莉花組織培養方法要求外植體接種在高溫高壓滅菌后的無菌培養基中才能正常生長，耗能大，人工操作成本高。如果能通過藥物抑菌的方法來改造培養基，使培養基無需經過高溫高壓滅菌，就能夠獲得茉莉花的正常生長。然而，針對不同的植物品種難以篩選到一種合適的抗菌劑，往往是當培養基抗菌時，植物組織的生長就受到抑制；而植物組織正常生長，就無法獲得滿意的抗菌效果。其原因，一是還沒有一種抗生素對所有的菌類都有效，而且抗生素藥效期短；二是有些抗菌素、防腐劑在有效的濃度下，其殺菌、抗菌離子對植物組織直接產生傷害，有些則產生鹽害。必須選擇與植物組織親和、藥效期長(至少一個生長周期)，不產生鹽害并具有殺菌、抗菌活性的物質作為抗菌劑。因此，篩選合適的抗菌藥劑是抑菌組培技術得以應用的關鍵。

本發明就是為茉莉花組織培養提供一種抑菌培養方法。一方面可以降低茉莉花組織培養對設施設備的要求，尤其不需要高溫高壓滅菌所需配置的高壓鍋設備，縮減了投資成本，電能消耗大幅度降低；另一方面，采用這種培養基開展茉莉花組織培養，組培環節大為簡化，人工操作的速度大幅提高，從而降低了人工成本。此外，由于改造后的培養基自身具有殺菌、抗菌或抑菌作用，能有效控制組織培養過程中的污染問題，又不會對茉莉花生長產生毒害或抑制，即不影響茉莉花的正常生長，從根本上簡化了茉莉花組織培養。

發明內容

本發明的目的是提供一種利用抑菌培養基培育茉莉花的組培方法。

本發明的目的是通過以下方法實現的。

本發明的一種利用抑菌培養基培育茉莉花的組培方法，包括培養容器消毒、培養基配制、無菌水制備、誘導培養、增殖培養、生根培養和瓶苗移栽，其特征在于：

1.培養容器消毒：將培養瓶、瓶蓋及接種用的塑料盤在100mg/L次氯酸鈉+10mg/L環絲氨酸+0.5mg/L十二烷基磺酸鈉的水溶液中浸泡不少于10h，保存備用；

2.培養基配制：誘導培養基為MS+1～3mg/L 6-BA+0.1～1.0mg/L IBA+40～100mg/L次氯酸鈉+1～5mg/L環絲氨酸+10～50mg/L丙酸鈣+0.05～0.2mg/L十二烷基磺酸鈉+30g/L蔗糖+3.0g/L瓊脂粉，pH5.8；增殖培養基為：MS+1～2mg/L 6-BA+0.1～0.5mg/L IBA+40～100mg/L次氯酸鈉+1～5mg/L環絲氨酸+10～50mg/L丙酸鈣+0.05～0.2mg/L十二烷基磺酸鈉+30g/L蔗糖+3.0g/L瓊脂粉，pH5.8；生根培養基為1/2MS+1～3mg/L IBA+40～100mg/L次氯酸鈉+1～5mg/L環絲氨酸+10～50mg/L丙酸鈣+0.05～0.2mg/L十二烷基磺酸鈉+30g/L蔗糖+3.0g/L瓊脂粉，pH5.8；所述MS，為1962年，Murashige和Skoog公開的MS培養基；所述6-BA，指6-芐氨基嘌呤；所述IBA，指α-吲哚丁酸；配制培養基時，先稱各培養基配方中的蔗糖和瓊脂粉，加培養基總重量1/2的自來水，加熱至瓊脂粉完全溶解，再按各培養基配方配齊其他原料后，定容，然后用1mol/L的NaOH或1mol/L的HCl調pH值至5.8，分裝到消毒過的培養容器中，封口，冷卻凝固后備用；