本發明公開了一種耐冷假單胞菌胞外蛋白酶失活方法，包括以下步驟：將含有耐冷假單胞菌胞外蛋白酶的溶液在50?70℃熱浴加熱2?4min，再經800W微波加熱60?120s。上述的胞外蛋白酶失活方法，與低溫失活方法相比，大大縮短了處理時間，降低能耗，滅活效果也優于傳統方法，并且，不會破壞胞外蛋白酶所處的溶液環境中的其他營養物質。

技術領域

本發明屬于微生物的酶失活領域，具體涉及一種耐冷假單胞菌胞外蛋白酶失活方法。此外，本發明還涉及一種原料乳的處理方法，以及經該方法處理后得到的原料乳。

背景技術

假單胞菌是原料乳中常見的占主導地位的耐冷菌群。耐冷假單胞菌能在原料乳冷藏過程中分泌耐熱蛋白酶，這種蛋白酶難以通過高溫加熱的方式加以滅活，其耐熱的機理是：經過高溫處理后，未被破壞的處于非折疊狀態的蛋白酶分子(無活性)重新折疊成有活性的天然構象。因此這類酶能夠耐受巴氏滅菌(72℃/15s)或超高溫(120～150℃/0.5～8.0s)滅菌工藝，無法通過單一的熱處理完全滅活。

耐熱蛋白酶主要通過降解酪蛋白引起原料乳物理化學性質發生明顯變化，包括原料乳沉積，Zeta電勢和酪蛋白膠束水合作用降低，以及釋放出多肽，從而導致原料乳變質，影響后續乳產品的貨架期。

當前采用的耐冷菌蛋白酶失活方法有高溫失活法和低溫失活法，高溫失活法由于溫度高，會破壞乳品營養成分；而低溫失活法處理時間過長，能耗大。因此，如何不破壞乳品營養成分又快速地使耐冷假單胞菌的胞外蛋白酶失活，這是本領域技術人員亟待解決的問題。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明提供了一種新的耐冷假單胞菌的胞外蛋白酶失活方法，通過該方法既能避免高溫破壞原料乳的營養成分，同時大大縮短了低溫處理的時間，降低了失活過程中消耗的能源。

具體的，一方面，提供了一種耐冷假單胞菌胞外蛋白酶失活方法，包括以下步驟：將含有耐冷假單胞菌胞外蛋白酶的溶液在50-70℃熱浴加熱2-4min，再經800W微波加熱60-120s。

進一步地，上述微波加熱時間為90s。

進一步地，上述熱浴加熱的溫度為55℃，時間為3.5min。

進一步地，上述熱浴為金屬浴。

第二方面，提供了一種原料乳的處理方法，包括以下步驟：將原料乳在50-70℃熱浴加熱2-4min，再經800W微波加熱60-120s。

第三方面，提供了一種原料乳，經上述的處理方法進行處理后得到。

進一步地，原料乳中耐冷假單胞菌菌體數量低于10⁵cfu/ml。

上述耐冷假單胞菌胞外蛋白酶失活方法，首先將含有耐冷假單胞菌胞外蛋白酶的溶液在50-70℃熱浴加熱2-4min，使胞外蛋白酶在處于最佳失活溫度范圍情況下先開始自降解，而后通過微波800W加熱60-120s，促進溶液中分子內的振動，破壞蛋白酶空間折疊，并加速蛋白酶肽鏈和自身催化位點結合，促進肽鏈斷裂以及降解后的肽段從反應位點離去，進而加速使胞外蛋白酶徹底失活。

此外，上述的胞外蛋白酶失活方法，與低溫失活方法相比，大大縮短了處理時間，降低能耗，滅活效果也優于傳統方法，并且，不會破壞胞外蛋白酶所處的溶液環境中的其他營養物質。

具體實施方式

為更清楚的對本發明技術方案予以闡述，下面將結合實施例對本發明的技術方案進行進一步闡述。