[發(fā)明專利]用于檢測羧肽酶Y的半菁類熒光探針及其制備方法和應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201611122778.5 | 申請日： | 2016-12-08 |
| 公開（公告）號： | CN108191838B | 公開（公告）日： | 2019-10-08 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 楊光富;楊文超;楊庶侯 | 申請（專利權(quán)）人： | 華中師范大學(xué) |
| 主分類號： | C07D405/06 | 分類號： | C07D405/06;C09K11/06;C12Q1/37;G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京潤平知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11283 | 代理人： | 喬雪微;嚴(yán)政 |
| 地址： | 430079 湖*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 羧肽酶Y 熒光探針 式( 1 ) 式( 2 ) 檢測 制備方法和應(yīng)用 活性檢測 檢測領(lǐng)域 檢測試劑 親核反應(yīng) 特戊酰氯 有機溶劑 靈敏度 縛酸劑 探針 戊基 熒光 制備 應(yīng)用 合成 | ||
1.一種半菁類熒光探針，其特征在于，該半菁類熒光探針具有式(1)所示的結(jié)構(gòu)；
2.權(quán)利要求1所述的半菁類熒光探針的制備方法，其特征在于，該方法包括：在縛酸劑存在下于有機溶劑中，將式(2)所示結(jié)構(gòu)化合物與特戊酰氯接觸進(jìn)行親核反應(yīng)；
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其中，相對于1毫摩爾的式(2)所示結(jié)構(gòu)化合物，所述特戊酰氯的用量為1-2毫摩爾，所述縛酸劑的用量為1-3毫摩爾，所述有機溶劑的用量為20-30毫升。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其中，所述縛酸劑選自三乙胺、二乙胺、二異丙基胺、吡啶、N,N-二甲氨基吡啶、2,6-二甲基吡啶、碳酸鉀、碳酸銫、碳酸鈉和碳酸氫鈉中的至少一種；所述有機溶劑選自二氯甲烷、四氫呋喃、氯仿、四氯化碳、乙腈、丙酮、乙二醇二甲醚、N,N-二甲基甲酰胺和1,2-二氯乙烷中的至少一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求2-4中任意一項所述的制備方法，其中，所述親核反應(yīng)的條件包括：溫度為零下5℃至30℃，時間為10-120min。
6.權(quán)利要求1所述的半菁類熒光探針在檢測羧肽酶Y的活性中的應(yīng)用。
7.一種檢測羧肽酶Y活性的方法，其特征在于，該方法包括：
將待測樣品與權(quán)利要求1所述的半菁類熒光探針接觸，使得待測樣品中的羧肽酶Y被所述半菁類熒光探針中的特戊酰基所識別，得到接觸后的物料；
檢測接觸后的物料在激發(fā)光下發(fā)出的熒光強度隨時間的增加值，所述熒光強度的增加值指示了待測樣品中羧肽酶Y的活性；所述激發(fā)光的波長為500-680nm，所述熒光的發(fā)射波長為690-740nm。
8.權(quán)利要求7所述的檢測方法，其中，相對于1μg/mL的羧肽酶Y，所述半菁類熒光探針的用量為2-100μM。
9.權(quán)利要求8所述的檢測方法，其中所述半菁類熒光探針的用量為2-10μM。
10.權(quán)利要求7-9任意一項所述的檢測方法，其中，接觸的條件包括：溫度為25-37℃，pH值為5-9，時間為5-40min。
11.一種羧肽酶Y活性的檢測試劑盒，該檢測試劑盒包括：權(quán)利要求1所述的半菁類熒光探針、羧肽酶Y標(biāo)準(zhǔn)品以及反應(yīng)緩沖液。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于華中師范大學(xué)，未經(jīng)華中師范大學(xué)許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.17sss.com.cn/pat/books/201611122778.5/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
