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[發明專利]一種減少液體菌種培養過程操作污染的方法有效

專利信息
申請號: 201610789477.1 申請日: 2016-08-31
公開(公告)號: CN106416749B 公開(公告)日: 2020-02-07
發明(設計)人: 余兆豐;周川蓉;余蒙 申請(專利權)人: 四川寶生藥業發展有限公司
主分類號: A01G18/00 分類號: A01G18/00
代理公司: 51220 成都行之專利代理事務所(普通合伙) 代理人: 譚新民
地址: 610000 四川省成都市溫江區*** 國省代碼: 四川;51
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 封口 培養管 培養瓶 滅菌 開口 液體菌種培養 蛹蟲草菌絲體 培養基原料 操作污染 過程操作 密閉環境 無菌條件 液體菌種 有效解決 培養基 連接管 分裝 無菌 菌種 接種 配制 消毒 污染 應用
【權利要求書】:

1.一種減少液體菌種培養過程操作污染的方法,其特征在于,包括以下操作步驟:

1)配制培養基

將配制好的培養基分裝到培養管中;

2)消毒滅菌

對培養管中的培養基滅菌30—45分鐘;

3)接種

在無菌條件下,將第一連接管(2)的兩端分別插入至第一培養瓶(1)、第二培養瓶(3)中,從培養管中選取菌種塊通過第一培養瓶(1)的開口置于第一培養瓶(1)的瓶內,封口,第一培養瓶(1)內裝有固體培養基,第二培養瓶(3)為空瓶,第一培養瓶(1)內接種后,第一培養瓶(1)內固體培養基通過第一連接管(2)通入第二培養瓶(3)中,在18—20℃下培養,培養3—5天即可;

第三培養瓶(4)中裝入液體培養基,第二培養瓶(3)與第三培養瓶(4)通過第二連接管(5)連接,待第一培養瓶(1)、第二培養瓶(3)內有菌落出現時,將第三培養瓶(4)中的液體培養基分別反壓至第一培養瓶(1)、第二培養瓶(3)內進行深層培養,然后將第一培養瓶(1)、第二培養瓶(3)內培養好的菌種通過密閉管道反壓至發酵罐中培養。

2.根據權利要求1所述的一種減少液體菌種培養過程操作污染的方法,其特征在于:所述菌種塊面積為4mmx5mm—6mmx6mm。

3.根據權利要求2所述的一種減少液體菌種培養過程操作污染的方法,其特征在于:所述步驟2)中消毒滅菌的溫度為121℃、壓力為0.12MPa。

4.根據權利要求3所述的一種減少液體菌種培養過程操作污染的方法,其特征在于:所述培養管中選取的培養基體積為每支培養管體積的1/5-1/4。

5.根據權利要求1所述的一種減少液體菌種培養過程操作污染的方法,其特征在于:所述步驟2)中,培養管經消毒滅菌后,培養管與水平線呈15—45°,在室溫下,開始接種,然后在恒溫振蕩器中于23—24℃下靜置培養。

6.根據權利要求1所述的一種減少液體菌種培養過程操作污染的方法,其特征在于:所述接種是在超凈工作臺上操作。

7.根據權利要求6所述的一種減少液體菌種培養過程操作污染的方法,其特征在于:所述接種前對超凈工作臺紫外燈消毒25—30min。

8.根據權利要求7所述的一種減少液體菌種培養過程操作污染的方法,其特征在于:所述第一培養瓶(1)、第二培養瓶(3)、第三培養瓶(4)、第一連接管(2)、第二連接管(5)、培養管均經過消毒滅菌處理。

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