技術領域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領域，涉及Bcl-xL抑制劑與溶瘤病毒的聯(lián)合在制備抗腫瘤藥物中的應用。

背景技術

溶瘤病毒(oncolytic virus)是一類靶向性感染并殺傷腫瘤細胞，而不破壞正常細胞的可復制病毒。溶瘤病毒療法(oncolytic virotherapy)是一種創(chuàng)新的腫瘤靶向治療策略，它利用天然的或經(jīng)基因工程改造的病毒選擇性的感染腫瘤細胞，并在腫瘤細胞中復制，達到靶向性溶解、殺傷腫瘤細胞的作用，但是對正常細胞沒有損傷。

M1病毒(Alphavirus M1)屬于甲病毒屬(Alphavirus)，其在制備抗腫瘤藥物方面具有較好的應用效果。例如中國發(fā)明專利申請201410425510.3公開了M1病毒能選擇性引起腫瘤細胞死亡而不影響正常細胞存活。然而，不同腫瘤對M1病毒的敏感性不一，對于某些腫瘤，M1病毒單獨用藥時，溶瘤作用還不夠理想。例如中國發(fā)明專利申請201410425510.3所記載的，M1作為抗腫瘤藥物使用時，對于結直腸癌、肝癌、膀胱癌和乳腺癌的效果不如胰腺癌、鼻咽癌、前列腺癌和黑色素瘤明顯；而膠質瘤、宮頸癌、肺癌則更其次；而胃癌則最不顯著。

篩選增加溶瘤病毒腫瘤治療效果的化合物有望增加溶瘤病毒的抗瘤譜及抗瘤強度。發(fā)明人此前申請的專利201510990705.7中，將大黃酚及其衍生生物作為溶瘤病毒的抗瘤增效劑，二者組合可以將腫瘤細胞的存活率降低至39.6％，但其抗癌強度存在很大的進步空間。本發(fā)明的目的在于提供一種溶瘤病毒抗瘤增效劑，能夠起到更好的抗癌效果。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的之一在于提供Bcl-xl抑制劑在制備溶瘤病毒抗瘤增效劑方面的應用。

本發(fā)明的另一個目的在于提供一種抗瘤藥物組合物，其可以使得溶瘤病毒發(fā)揮更好的抗瘤效果。

本發(fā)明的另一個目的在于提供一種針對溶瘤病毒不敏感的腫瘤，安全有效的溶瘤病毒增效藥物。

發(fā)明通過以下技術方案實現(xiàn)上述目的：

發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)，Bcl-xL抑制劑可以增強溶瘤病毒的溶瘤效果。

所述的Bcl-xL抑制劑為抑制Bcl-xL蛋白活性的物質、或降解Bcl-xL蛋白的物質、或降低Bcl-xL蛋白水平的基因工具。

Bcl-2家族基因表達的蛋白稱為Bcl-2家族蛋白。Bcl-2家族成員是進化上相關的蛋白質。這些蛋白質控制線粒體外膜通透性(mitochondrial outer membrane permeabilization,MOMP)，目前已知Bcl-2家族總共由25個基因組成，其中Bax,BAD,Bak和Bok等成員可以產(chǎn)生促細胞凋亡作用，而bcl-2、Bcl-xL和Bcl-w等產(chǎn)生抗細胞凋亡作用。Bcl-2家族蛋白是細胞凋亡途徑中一種重要的蛋白，在腫瘤的發(fā)生及轉移中起著重要的作用。由于bcl-2、Bcl-xL和Bal-w等Bcl-2家族蛋白在癌細胞中高度表達，因此，Bcl-2家族蛋白抑制劑可以選擇性地在腫瘤細胞中發(fā)揮抗腫瘤的作用。

然而，難以預見的是，并不是所有的Bcl-2家族蛋白的抑制劑均可以起到協(xié)同增強溶瘤病毒的溶瘤效果。

發(fā)明人通過用Bcl-xL和Bcl-w干擾片段(Si RNA)抑制這兩個基因的表達，降低相應蛋白的表達量，結果發(fā)現(xiàn)，單獨干擾Bcl-xL和Bcl-w和未干擾并未引起細胞形態(tài)病變，同時單獨應用M1病毒也不引起細胞形態(tài)病變，只有干擾Bcl-xL聯(lián)合應用M1病毒組引起了顯著細胞形態(tài)病變，干擾Bcl-w聯(lián)合應用M1病毒組不能引起顯著細胞形態(tài)病變。此外，發(fā)明人采用單獨bcl-2的抑制劑ABT-199聯(lián)合溶瘤病毒處理腫瘤細胞，腫瘤細胞存活率并沒有顯著性差異，說明抑制Bcl-2不能引起M1病毒溶瘤效應的增加。

因此發(fā)明人推測，只有通過抑制Bcl-xL才可以顯著增強溶瘤病毒的溶瘤效應。針對該推測，發(fā)明人采用了抑制Bcl-xL活性化合物ABT-263或ABT-737協(xié)同溶瘤病毒尤其是M1病毒作用于腫瘤細胞，實驗結果發(fā)現(xiàn)，ABT-263或ABT737或其組合，均可以協(xié)同溶瘤病毒增強抗腫瘤效應。

ABT-263(Navitoclax)是Bcl-2家族蛋白抑制劑中的一種，它是Bcl-xL、Bcl-2和Bcl-w蛋白的抑制劑，K_i分別為≤0.5nM，≤1nM和≤1nM，但與Mcl-1和A1結合微弱。