技術領域

本發明屬于雜糧深加工領域，具體涉及的是酶解法制備黑豆ACE抑制肽。

背景技術

隨著社會的發展，人們的生活水平得到提高，飲食結構改變，高血壓以及高血壓性心臟損害患病率增加。目前，對于高血壓疾病的治療多采用合成藥物，這些合成藥物需要長時間使用，存在明顯的副作用，還會使機體產生明顯的藥物依賴性；另外，在現代生活中，各種激素所致的免疫力降低是目前人類普遍處于免疫力低下的“亞健康”狀態，因此，如何預防和治療高血壓，提高機體免疫調節能力已成為全社會共同關注的焦點。存在于天然動植物資源的降血壓功能因子，具有安全有效，無毒副作用等特點，在國內外受到廣泛關注。其中，降壓肽已成為了當今高血壓防治研究中的一個熱點。

黑豆中含有豐富的蛋白質、淀粉、礦物質、維生素以及人體必需氨基酸。黑豆可以補血養腎、降低膽固醇、清熱解毒、美容養顏、改善腸胃；能軟化血管、滋潤皮膚延緩衰老，特別是對高血壓、心臟病、肝臟、動脈硬化等老年性疾病大有益處。目前，對于黑豆的加工，大多數廠家都側重于黑豆淀粉的生產加工，而忽略了蛋白質的存在，把它作為生產廢料或牲畜飼料，造成黑豆資源的浪費，增加了黑豆淀粉的生產成本。

肽是蛋白質的酶解產物，肽在原蛋白序列中沒有生物活性，在食品加工過程或胃腸消化過程中這部分肽被釋放出來后顯示出一定的生物活性。有關研究表明，蛋白質經可控酶解作用可制備出具有促進鈣吸收、降血壓、降膽固醇、抗氧化等作用的功能肽，而且食物源蛋白質制備得到的肽具有天然安全的特點。因此對于生物活性肽的開發是當前國際食品界最熱門的研究課題和極具發展前景的項目。

發明內容

一種酶解法制備黑豆ACE抑制肽，這種酶解法制備黑豆ACE抑制肽的具體工藝如下：

(1)將黑豆蛋白粉溶解于小分子活化水中，配置成質量百分比濃度為10％～40％的蛋白質溶液；將蛋白溶液置于90℃恒溫水浴鍋中預熱10～15min后再冷卻至40～50℃；

(2)黑豆蛋白的酶解：將冷卻的黑豆蛋白溶液用1mol/L的NaOH調節，使pH值在8.0～9.0；加入酶用量與底物蛋白質量之比為2％～3％的堿性蛋白酶，，于50-55℃的水浴下水解2～4h，反應過程中不斷加入1mol/L的NaOH，使溶液pH值維持恒定，待水解結束后調節pH值到7.0，100℃左右滅活10分鐘，移出上清液；

(3)將步驟(2)制備的黑豆肽采用截留分子量分別為1kDa和3kDa的超濾膜進行處理， 將截留后的1kDa～3kDa的濾過液經冷凍干燥即得黑豆ACE抑制肽粉末產品；

實施方式

實施例1

(1)黑豆蛋白粉溶解于小分子活化水，配置成25％的蛋白溶液，將蛋白溶液至于90℃恒溫水浴鍋中預熱10min，將預熱后的黑豆蛋白溶液冷卻至50℃。

(2)黑豆蛋白的酶解：將冷卻后的黑豆蛋白溶液用1mol/L的NaOH調節，使pH值為9.0。加入酶用量與底物蛋白質量之比為2％的堿性蛋白酶(酶活力為200000U)，于55℃下的水浴中水解3h，反應過程中不斷加入1mol/L的NaOH，使溶液pH值維持恒定，待水解結束后調節pH值到7.0，100℃左右滅活10分鐘，移出上清液。

(3)黑豆降壓肽的制備：將步驟(2)制備的黑豆肽采用截留分子量分別為1kDa和3kDa的超濾膜進行處理，將截留后的1kDa～3kDa的過濾液經冷凍干燥即得黑豆ACE抑制肽粉末產品。

實施例2

(1)黑豆蛋白粉溶解于小分子活化水，配置成25％的蛋白溶液，將蛋白溶液至于90℃恒溫水浴鍋中預熱10min，將預熱后的黑豆蛋白溶液冷卻至50℃。

(2)黑豆蛋白的酶解：將冷卻后的黑豆蛋白溶液用1mol/L的NaOH調節，使pH值為9.0。加入酶用量與底物蛋白質量之比為2.5％的堿性蛋白酶(酶活力為200000U)，于55℃下的水浴中水解4h，反應過程中不斷加入1mol/L的NaOH，使溶液pH值維持恒定，待水解結束后調節pH值到7.0，100℃左右滅活10分鐘，移出上清液。

(3)黑豆降壓肽的制備：將步驟(2)制備的黑豆肽采用截留分子量分別為1kDa和3kDa的超濾膜進行處理，將截留后的1kDa～3kDa的過濾液經冷凍干燥即得黑豆ACE抑制肽粉末產品。