[發(fā)明專利]一種用于治療乳腺癌的基因工程疫苗及其制備方法無(wú)效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201610087798.7 | 申請(qǐng)日: | 2016-02-16 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN105727283A | 公開(kāi)(公告)日: | 2016-07-06 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 楊廷穩(wěn) | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 楊廷穩(wěn) |
| 主分類號(hào): | A61K39/39 | 分類號(hào): | A61K39/39;A61K39/00;A61K38/19;A61P35/00;C12N15/27;C12N15/86 |
| 代理公司: | 長(zhǎng)沙星耀專利事務(wù)所 43205 | 代理人: | 許伯嚴(yán) |
| 地址: | 473000 河南*** | 國(guó)省代碼: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 用于 治療 乳腺癌 基因工程 疫苗 及其 制備 方法 | ||
1.用于治療乳腺癌的基因工程疫苗,其特征在于,包括GM-CSF基因修飾的人乳腺癌細(xì)胞和佐劑;
所述GM-CSF基因修飾的人乳腺癌細(xì)胞通過(guò)如下步驟制備:
步驟S1,用含GM-CSF基因的重組仙臺(tái)病毒上清液感染人乳腺癌細(xì)胞,得到GM-CSF基因修飾的人乳腺癌細(xì)胞;
步驟S2,對(duì)步驟S1得到的GM-CSF基因修飾的人乳腺癌細(xì)胞滅活并進(jìn)行熱休克處理;
所述佐劑通過(guò)如下步驟制備:
步驟S1,取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的人乳腺癌細(xì)胞接種于含體積百分比10%FBS的RPMI1640細(xì)胞培養(yǎng)液中,加入15~25μmol/mL的如下結(jié)構(gòu)式的化合物(Ⅰ)培養(yǎng)36~48h得細(xì)胞培養(yǎng)液,
步驟S2,將細(xì)胞培養(yǎng)液離心棄上清液,沉淀懸浮于生理鹽水中,再放入液氮中冷凍5~10分鐘,再將冷凍物取出,放入37℃溫水融化,如此反復(fù)凍融3~5次,即可得所述佐劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療乳腺癌的基因工程疫苗,其特征在于,所述佐劑通過(guò)如下步驟制備:步驟S1,取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的人乳腺癌細(xì)胞5×107個(gè)接種于1ml含體積百分比10%FBS的RPMI1640細(xì)胞培養(yǎng)液中,加入20μmol/mL的所述化合物(Ⅰ)培養(yǎng)42h得細(xì)胞培養(yǎng)液;步驟S2,將細(xì)胞培養(yǎng)液離心棄上清液,沉淀懸浮于1ml生理鹽水中,再放入液氮中冷凍5~10分鐘,再將冷凍物取出,放入37℃溫水融化,如此反復(fù)凍融3~5次,即可得所述佐劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于治療乳腺癌的基因工程疫苗,其特征在于:所述人乳腺癌細(xì)胞為SKBR3人乳腺癌細(xì)胞系。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于治療乳腺癌的基因工程疫苗,其特征在于:所述滅活方法為采用60Co照射滅活。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于治療乳腺癌的基因工程疫苗,其特征在于,所述熱休克處理方法為:將人乳腺癌細(xì)胞置于42℃~65℃條件下溫浴0.5h~2h。
6.權(quán)利要求1所述的用于治療乳腺癌的基因工程疫苗在制備預(yù)防或治療乳腺癌的藥物中的應(yīng)用。
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