技術領域

本發明涉及腫瘤治療領域，尤其涉及一種可異體移植的嵌合抗原受體T細胞及制備方法。

背景技術

腫瘤一直以來都是困擾全世界的重大疾病，嚴重危害人類健康。因此，尋找有效的腫瘤治療方法，徹底攻克腫瘤是世界醫學界的重要研究課題。目前，傳統的三大主要治療手段即手術治療、化療、放療這三大主要治療手段雖然是全球腫瘤治療的基本手段方法，然而其治療效果有限。

其中傳統手術切除是腫瘤行業中最基本、最重要的腫瘤治療手段。放療是用放射線照射癌組織，以抑制和殺滅癌細胞的一種治療方法，是大多數腫瘤的輔助療法，然而由于放療對癌細胞和正常細胞沒有分辨能力，多次放療后，患者會產生一系列毒副作用和反應，對中晚期腫瘤患者，放療作用有限。化療是利用化學藥物殺死腫瘤細胞、抑制腫瘤細胞的生長繁殖的一種治療方式，但對大多數腫瘤的治療的有效性較低。并且，化療與放療一樣，其在殺傷腫瘤細胞的同時，也將正常細胞和免疫細胞一同殺滅，導致病患者免疫能力和身體機能下降，生活質量降低。

目前，免疫腫瘤療法正在全世界興起，為腫瘤患者帶來了曙光。而免疫療法中最有效果的療法是基于嵌合抗原受體T細胞(ChimericantigenreceptorTcells,CART)療法。其基本原理是利用基因工程改造從腫瘤患者自身身體中分離培養的T細胞，即通過逆轉錄病毒和慢病毒載體給T細胞加入一個能特異識別腫瘤細胞，并且同時激活T細胞殺死腫瘤細胞的嵌合抗體。然后將這些基因工程改造的T細胞進行體外擴增后回輸到患者體內，使免疫細胞具有特異性識別和殺傷腫瘤的能力，從而達到治療腫瘤的效果。

嵌合抗原受體（chimericantigenreceptor,CAR）主要由三部分組成，位于細胞外的抗原結合區scFv，跨膜區以及胞內信號轉導結構域組成。其中，根據胞內信號轉導結構域的研究發展，CAR可以分為第一代CAR、第二代CAR以及第三代CAR。第一代CAR僅含有一個信號單元，大多來自于CD3ζ，對腫瘤的殺傷效果很不理想。第二代CAR是在第一代CAR的胞內信號轉導結構域基礎之上增加了一個共刺激結構域，比如CD28、OX40或者4-1BB，能夠提高CART細胞殺傷腫瘤的療效，但是效果還不能令人滿意。目前，大多數CAR都是第三代CAR，其主要是在在第二代CAR的胞內結構域基礎之上再增加一個共刺激結構域，因此具有三個個共刺激結構域，研究發現這樣極大地提高了CART細胞的擴增倍數以及T細胞在體內存活的時間，達到治療腫瘤的效果。

雖然CART技術在治療腫瘤上面顯示出了巨大的優勢和效果，然而，由于CART治療腫瘤非常的個體化，即必須要分離腫瘤患者自身的T細胞，這在實際應用之中具有相當大的困難，也存在許多的不足。首先是絕大多數腫瘤患者采用CART治療腫瘤時都是在其他腫瘤治療方法失去效果的情況下進行的，在經過手術治療，尤其是在經過化療和放療之后，患者的免疫系統遭到毀滅性的破壞，其自身的T細胞數量極其有限，這會造成分離T細胞困難。第二，經過放化療至后，患者自身的T細胞遭受化學藥物及射線的破壞，T細胞的活性非常低，尤其是細胞增殖能力非常低，分泌腫瘤殺傷因子的能力也大幅下降，進而不能夠有效殺傷腫瘤細胞。第三，CART治療前分離腫瘤患者自身的T細胞，在分離細胞的同時，無法完全避免分離的T細胞里面有少量的腫瘤細胞也混雜在分離的細胞里面，即便經過大規模的體外擴增，由于放化療之后的腫瘤細胞活性更高，因此獲得的T細胞里面也具有大量的腫瘤細胞，在輸入患者體內之后，這些腫瘤細胞也會再次輸入患者體內，為患者造成了致命打擊。第四，經過放化療的腫瘤患者身體極其脆弱，腫瘤隨時都可能復發，留給患者的時間非常不足，往往在經過極其短的時間，甚至一兩周之內就會復發，然而，個體化分離患者的T細胞、然后在經過基因改造成CART細胞，其后再大規模體外培養、最后輸入患者，這段時間會經歷非常長的時間，往往會需要幾個月的時間，而這段準備CART的時間之內，患者可能已經失去生命。

因此，現有技術還有待于改進和發展。

發明內容

鑒于上述現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種可異體移植的嵌合抗原受體T細胞及制備方法，旨在解決現有T細胞分離困難、不能夠有效殺傷腫瘤細胞及混雜有腫瘤細胞的問題。

本發明的技術方案如下：

一種可異體移植的嵌合抗原受體T細胞，所述嵌合抗原受體T細胞包括T細胞和嵌合抗原受體，其中，所述T細胞為經過基因工程改造的能夠進行異體移植的T細胞。

所述的可異體移植的嵌合抗原受體T細胞，其中，所述T細胞為經過基因定點敲除技術在特定基因改造的T細胞。