[發明專利]肽文庫構建方法及相關載體有效
| 申請號： | 201580081102.3 | 申請日： | 2015-07-03 |
| 公開（公告）號： | CN107849737B | 公開（公告）日： | 2020-06-26 |
| 發明（設計）人： | 王珠銀;李向群 | 申請（專利權）人： | 湖南中晟全肽生化有限公司 |
| 主分類號： | C40B40/10 | 分類號： | C40B40/10;C12N1/21;C12N15/74 |
| 代理公司： | 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 黃天天 |
| 地址： | 412000 湖南省株洲市云龍示*** | 國省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 文庫 構建 方法 相關 載體 | ||
1.一種用于構建四肽全庫的方法，所述方法包括：（i）設計3,405個經表達的帶標簽的50-mer肽，其中，每個50 mer肽包含47個不同的連續四肽；（ii）構建一系列表達載體，其中每個載體表達單個帶標簽的肽；（iii）通過將親和標簽結合到固定的固體表面來純化所述帶標簽的肽；（iv）洗脫所述帶標簽的肽并用于篩選，或使用固定的肽直接進行篩選而不從固相洗脫。
2.一種用于構建五肽全庫的方法，所述方法包括：（i）設計69,665個經表達的帶標簽的50-mer肽，每個50 mer肽包含46個不同的連續五肽；（ii）構建一系列表達載體，其中每個載體表達單個帶標簽的肽；（iii）通過將親和標簽結合到固定的固體表面來純化所述帶標簽的肽；（iv）洗脫所述帶標簽的肽并用于篩選，或使用固定的肽直接進行篩選而不從固相洗脫。
3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，其中所述標簽選自GST、Trx、SUMO、CBD、FLAG、HA、Avi標簽、His標簽、Myc-標簽、SBP、Strep-標簽物、Fc-標簽、Halo-標簽、V5、VSV和MBP。
4.根據權利要求1或2所述的方法，其中表達宿主選自細菌細胞、昆蟲細胞、真菌細胞、哺乳動物細胞和植物細胞。
5.根據權利要求1或2所述的方法，其中所述表達載體選細菌表達載體、昆蟲表達載體、真菌表達載體、哺乳動物表達載體和植物表達載體。
6.根據權利要求1或2所述的方法，其中將一段多肽序列作為接頭添加在所述標簽與所述肽之間以增加所述肽的可接近性。
7.根據權利要求1或2所述的方法，其中將蛋白酶識別序列添加在所述標簽與所述肽之間以使得可以使用蛋白酶從所述標簽上切割所述肽。
8.一種含有根據權利要求1或2任一項所述的方法所構建的多肽庫的產品。
9.權利要求8所述的產品在進行多肽藥物篩選中的應用。
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