[發明專利]一種葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料及其制備方法有效
| 申請號: | 201510027979.6 | 申請日: | 2015-01-20 |
| 公開(公告)號: | CN104558246B | 公開(公告)日: | 2017-03-01 |
| 發明(設計)人: | 王勇;陸晴漪;何法 | 申請(專利權)人: | 武漢理工大學 |
| 主分類號: | C08B37/08 | 分類號: | C08B37/08;A61K47/36 |
| 代理公司: | 湖北武漢永嘉專利代理有限公司42102 | 代理人: | 唐萬榮 |
| 地址: | 430070 湖*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 葉酸 生物素 修飾 聚糖 材料 及其 制備 方法 | ||
1.一種葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料,其特征在于,所述葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料以殼聚糖為載體,葉酸和生物素為配體,利用N-酰化反應制備葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料。
2.根據權利要求1所述的葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料,其特征在于:所述殼聚糖分子量為20000-50000,脫乙酰度≥85%。
3.根據權利要求1所述的葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料,其特征在于:所述葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料中葉酸和生物素的接枝率均≥5%。
4.一種葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料的制備方法,其特征在于步驟如下:
1)制備殼聚糖溶液:將殼聚糖溶于醋酸溶液中,得到濃度為5-10mg/mL的殼聚糖溶液,并調節pH值至4.7-6.0,備用;
2)制備琥珀酰亞胺基生物素酯:將DCC、NHS與生物素按摩爾比1.2-1.5:1:1混合后于50-60℃條件下反應16-24h,過濾后在冰浴條件下向濾液中滴加乙醚析出沉淀,然后用異丙醇對沉淀進行重結晶,過濾收集結晶并用DMF溶解結晶,過濾后逐滴加入無水乙醚中,冷藏過夜,移走上清液,室溫下真空干燥得到琥珀酰亞胺基生物素酯,備用;
3)制備具有氨基反應活性的葉酸活性酯溶液:將葉酸溶于無水DMSO中,并加入EDC.HCl,在避光條件下于25-40℃磁力攪拌反應1-4h,得到葉酸活性酯溶液,濃度以葉酸質量濃度計為26-44mg/mL,備用;
4)將步驟2)所得琥珀酰亞胺基生物素酯溶于DMF中,得到濃度為20-34mg/mL的生物素酯溶液,在磁力攪拌條件下,將生物素酯溶液緩慢加入步驟1)所得殼聚糖溶液中,在室溫條件下反應至反應液澄清,然后在攪拌條件下緩慢加入步驟3)所得葉酸活性酯溶液,在室溫下繼續反應12-24h,反應結束后將反應液移入透析袋,于蒸餾水中透析3d,每6h換水一次,透析后經冷凍干燥即得到葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料。
5.根據權利要求4所述的葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料的制備方法,其特征在于:步驟3)所述葉酸與EDC.HCl的摩爾比為1:5-10。
6.根據權利要求4所述的葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料的制備方法,其特征在于:步驟4)所述琥珀酰亞胺基生物素酯與殼聚糖的摩爾比為20-30:1;所述葉酸活性酯與殼聚糖的摩爾比為20-30:1。
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