[發(fā)明專(zhuān)利]在用于檢測(cè)多聚靶分子的基于顆粒的測(cè)試中防止聚集的試劑、方法和設(shè)備有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201480044234.4 | 申請(qǐng)日: | 2014-06-05 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN105579849B | 公開(kāi)(公告)日: | 2019-02-22 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | T.H.埃維斯;M.W.J.普林斯;J.H.紐文休伊斯 | 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人: | 微型照顧私人有限公司 |
| 主分類(lèi)號(hào): | G01N33/543 | 分類(lèi)號(hào): | G01N33/543 |
| 代理公司: | 北京國(guó)昊天誠(chéng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11315 | 代理人: | 許志勇;王寧 |
| 地址: | 荷蘭艾恩德霍芬*** | 國(guó)省代碼: | 荷蘭;NL |
| 權(quán)利要求書(shū): | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū): | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 用于 檢測(cè) 多聚靶 分子 基于 顆粒 測(cè)試 防止 聚集 試劑 方法 設(shè)備 | ||
1.一種用于在測(cè)試中防止檢測(cè)顆粒聚集的方法,所述測(cè)試使用檢測(cè)顆粒來(lái)用于檢測(cè)樣品中包含兩個(gè)或更多個(gè)相似或相同表位的多表位靶分析物的存在和/或用于確定樣品中包含兩個(gè)或更多個(gè)相似或相同表位的多表位靶分析物的濃度,所述方法包括以下步驟:
應(yīng)用能夠特異性結(jié)合到所述多表位靶分析物上的至少一個(gè)表位的第一捕獲實(shí)體,其特征在于所述第一捕獲實(shí)體阻斷至少一個(gè)表位結(jié)合到檢測(cè)顆粒,
其中所述多表位靶分析物的所述檢測(cè)包括使用第二捕獲實(shí)體,其能夠如第一捕獲實(shí)體那樣特異性結(jié)合到所述多表位靶分析物的相同或相似表位,其中第二捕獲實(shí)體包含準(zhǔn)許第二捕獲實(shí)體結(jié)合到所述檢測(cè)顆粒的標(biāo)記,或者其中所述第二捕獲實(shí)體存在于所述檢測(cè)顆粒上。
2.一種用于檢測(cè)樣品中包含兩個(gè)或更多個(gè)相似或相同表位的多表位靶分析物的存在和/或用于確定樣品中包含兩個(gè)或更多個(gè)相似或相同表位的多表位靶分析物的濃度的方法,包括以下步驟:
-應(yīng)用能夠特異性結(jié)合到所述多表位靶分析物上的至少一個(gè)表位的第一捕獲實(shí)體,其特征在于所述第一捕獲實(shí)體阻斷至少一個(gè)表位結(jié)合到檢測(cè)顆粒;
-應(yīng)用第二捕獲實(shí)體,其能夠如第一捕獲實(shí)體那樣特異性結(jié)合到所述多表位靶分析物的相似或相同表位,其中第二捕獲實(shí)體包含準(zhǔn)許第二捕獲實(shí)體結(jié)合到所述檢測(cè)顆粒的標(biāo)記,或者其中第二捕獲實(shí)體存在于所述檢測(cè)顆粒上;以及
-利用能夠結(jié)合到所述第二捕獲實(shí)體上所存在的所述標(biāo)記的檢測(cè)顆粒或者利用包含能夠特異性結(jié)合到所述多表位靶分析物的所述表位的第二捕獲實(shí)體的檢測(cè)顆粒,檢測(cè)所述多表位靶分析物,
其中防止所述檢測(cè)顆粒聚集。
3.權(quán)利要求2的方法,其中所述第一捕獲實(shí)體的數(shù)量和/或所述第二捕獲實(shí)體的數(shù)量取決于以下來(lái)確定
(i)待使用的檢測(cè)顆粒的數(shù)目;
(ii)用于多表位靶分析物的檢測(cè)的第二捕獲實(shí)體的數(shù)目;
(iii)多表位靶分析物上的相似或相同表位的數(shù)目;
(iv)多表位靶分析物的濃度范圍;
(v)第一捕獲實(shí)體對(duì)多表位靶分析物的親和力;
(vi)第二捕獲實(shí)體對(duì)多表位靶分析物的親和力;和/或
(vii)檢測(cè)顆粒上用于第二捕獲實(shí)體的標(biāo)記的結(jié)合位點(diǎn)的數(shù)目。
4.權(quán)利要求2的方法,其中所述第一捕獲實(shí)體與所述第二捕獲實(shí)體的比例為n-1至1,其中n為所述多表位靶分析物上的相同表位的數(shù)目。
5.權(quán)利要求2的方法,其中在添加所述檢測(cè)顆粒之前,使包含所述多表位靶分析物的所述樣品與所述第一和/或所述第二捕獲實(shí)體接觸。
6.權(quán)利要求2的方法,其中所述第一捕獲實(shí)體和/或所述第二捕獲實(shí)體為抗體、抗體片段、DNA分子、RNA分子或非免疫球蛋白。
7.權(quán)利要求6的方法,其中所述抗體片段包括Fab片段。
8.權(quán)利要求1或2的方法,其中樣品中所述多表位靶分析物的存在的所述檢測(cè)和/或樣品中的所述多表位靶分析物的濃度的所述確定在系統(tǒng)中執(zhí)行,包括以下步驟:
-結(jié)合所述多表位靶分析物至所述檢測(cè)顆粒,
-使結(jié)合到多表位靶分析物的檢測(cè)顆粒與系統(tǒng)的傳感器表面接觸;
-允許多表位靶分析物的不同表位通過(guò)系統(tǒng)的所述傳感器表面上所存在的第三捕獲實(shí)體而結(jié)合;以及
-檢測(cè)所述傳感器表面處剩余的顆粒。
9.權(quán)利要求8的方法,其中所述多表位靶分析物的不同表位包括非相同或不相似的表
位。
10.權(quán)利要求1或2的方法,其中所述檢測(cè)顆粒為磁顆粒。
11.權(quán)利要求8的方法,其中樣品中多表位靶分析物的存在的所述檢測(cè)和/或樣品中的所述多表位靶分析物的濃度的所述確定在光磁系統(tǒng)中執(zhí)行,并且其中光學(xué)檢測(cè)在靜止的樣品流體中進(jìn)行。
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