[發(fā)明專利]氨基酸營養(yǎng)缺陷型恢復(fù)的原核菌株用于重組產(chǎn)生多肽的用途在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201480009903.4 | 申請日: | 2014-02-19 |
| 公開(公告)號: | CN105026575A | 公開(公告)日: | 2015-11-04 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | E·科佩茨基;C·尚茨 | 申請(專利權(quán))人: | 弗·哈夫曼-拉羅切有限公司 |
| 主分類號: | C12P21/02 | 分類號: | C12P21/02 |
| 代理公司: | 北京市中咨律師事務(wù)所 11247 | 代理人: | 史文靜;黃革生 |
| 地址: | 瑞士*** | 國省代碼: | 瑞士;CH |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 氨基酸 營養(yǎng) 缺陷 恢復(fù) 菌株 用于 重組 產(chǎn)生 多肽 用途 | ||
1.用于在原核細(xì)胞中產(chǎn)生多肽的方法,其包括以下步驟:
-在化學(xué)成分明確的基礎(chǔ)生長培養(yǎng)基中培養(yǎng)原核細(xì)胞,并從所述原核細(xì)胞或所述原核細(xì)胞的細(xì)胞周質(zhì)或從培養(yǎng)基中回收多肽,所述原核細(xì)胞已經(jīng)通過將恢復(fù)親本原核細(xì)胞的氨基酸營養(yǎng)缺陷型的核酸引入到親本原核細(xì)胞的基因組內(nèi)獲得,所述原核細(xì)胞包含編碼多肽的一種或多種核酸。
2.權(quán)利要求1的方法,其特征在于相比于親本非營養(yǎng)缺陷型恢復(fù)的原核細(xì)胞的培養(yǎng)所需,所述營養(yǎng)缺陷型恢復(fù)的原核細(xì)胞的培養(yǎng)需要向生長培養(yǎng)基中補(bǔ)充較少的一種或兩種或三種或四種氨基酸。
3.權(quán)利要求1-2任一項的方法,其特征在于所述營養(yǎng)缺陷型恢復(fù)的原核細(xì)胞具有至少一種其他氨基酸營養(yǎng)缺陷型。
4.權(quán)利要求1-3任一項的方法,其特征在于在培養(yǎng)過程中不添加對應(yīng)于已經(jīng)在營養(yǎng)缺陷型恢復(fù)的原核細(xì)胞中恢復(fù)的營養(yǎng)缺陷型的氨基酸。
5.權(quán)利要求1-3任一項的方法,其特征在于在缺少對應(yīng)于已經(jīng)在營養(yǎng)缺陷型恢復(fù)的原核細(xì)胞中恢復(fù)的營養(yǎng)缺陷型的氨基酸的情況下進(jìn)行培養(yǎng)。
6.權(quán)利要求1-5任一項的方法,其特征在于所述原核細(xì)胞是大腸桿菌細(xì)胞。
7.權(quán)利要求1-6任一項的方法,其特征在于多肽是全長抗體鏈、單鏈抗體、單結(jié)構(gòu)域抗體、scFv、scFab、或上述之一與非抗體多肽的綴合物。
8.權(quán)利要求7的方法,其特征在于所述多肽是scFv或scFab與細(xì)胞毒性劑的綴合物。
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