1.檢測(cè)磺胺多殘留的ELISA試劑盒的制備及檢測(cè)方法，包括酶標(biāo)板、磺胺多殘留標(biāo)準(zhǔn)品、磺胺多殘留抗體工作液、磺胺多殘留酶標(biāo)二抗工作液、底物液A、底物液B、終止液和濃縮洗滌液。

2.檢測(cè)磺胺多殘留的ELISA試劑盒的制備及檢測(cè)方法，包括以下步驟：酶標(biāo)板的制備、磺胺多殘留標(biāo)準(zhǔn)品的制作、磺胺多殘留單克隆抗體及其工作液的制備、磺胺多殘留酶標(biāo)二抗工作液的制備、洗滌液的制備、底物液A的制備、底物液B的制備、終止液的制備。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述檢測(cè)磺胺多殘留的ELISA試劑盒的制備及檢測(cè)方法，其特征在于：所述的磺胺多殘留包被抗原是將磺胺多殘留半抗原與載體蛋白偶聯(lián)得到的，該載體蛋白為牛血清白蛋白(BSA)；用0.05mol/LpH9.6的碳酸鹽(CBS)緩沖液作為包被液，將磺胺多殘留抗原稀釋成1：100000比例，100μL/孔，37℃放置2h，取出酶標(biāo)板甩掉板內(nèi)液體，用稀釋后的濃縮洗滌液250μL/孔，洗板2次，30s/次；然后加入0.5%牛血清白蛋白(BSA)封閉，150μL/孔，37℃放置1.5h，棄去封閉液，拍干后的酶標(biāo)板放置恒溫間(25℃)晾干；抽檢合格后將酶標(biāo)板真空密封后置4℃下保存。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述檢測(cè)磺胺多殘留的ELISA試劑盒的制備及檢測(cè)方法，其特征在于：所述的磺胺多殘留標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為0ng/mL、0.5ng/mL、1.5ng/mL、4.5ng/mL、13.5ng/mL、40.5ng/mL。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述檢測(cè)磺胺多殘留的ELISA試劑盒的制備及檢測(cè)方法，其特征在于：所述的磺胺多殘留蛋白質(zhì)偶聯(lián)物單克隆抗體是采用磺胺多殘留人工抗原免疫兔所得，該抗體工作液用抗體稀釋液稀釋成1：30000。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述檢測(cè)磺胺多殘留的ELISA試劑盒的制備及檢測(cè)方法，其特征在于：所述的磺胺多殘留酶標(biāo)二抗工作液用酶標(biāo)二抗稀釋液稀釋成1：2000比例；所述底物液A為含有0.5mmol/L的過氧化氫脲的檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖溶液；所述底物液B為四甲基聯(lián)苯二胺的乙醇溶液；所述終止液為2mol/L的硫酸；所述濃縮洗滌液是10倍濃縮洗滌液，其包含0.5%吐溫-20，0.01mol/L的PBST，pH值范圍7.0-7.5之間。

7.權(quán)利要求2所述的檢測(cè)磺胺多殘留的ELISA試劑盒的制備及檢測(cè)方法，基于抗原抗體進(jìn)行間接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫反應(yīng)，該方法包括以下步驟：

(1)預(yù)處理待測(cè)樣品，即將待測(cè)試的樣品處理為液體樣品，或者用有機(jī)溶劑提取待測(cè)樣品，并將其復(fù)溶于樣品稀釋液工作液中；

(2)將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（20～25℃）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻；

(3)取包被有磺胺多殘留抗原的酶標(biāo)板，加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本20μL/孔到對(duì)應(yīng)的微孔中；

(4)加入磺胺多殘留抗體工作液，80μL/孔，輕輕振蕩混勻，加入磺胺多殘留酶標(biāo)二抗工作液，100μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置室溫25℃避光環(huán)境中反應(yīng)30min；小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌工作液250μL/孔，充分洗滌4~5次，每次間隔10s，用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)；

(5)加入底物液A50μL/孔，底物液B50μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置25℃避光環(huán)境中反應(yīng)15～20min；

(6)加入終止液50μL/孔，輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處或雙波長(zhǎng)450/630nm檢測(cè)，測(cè)定每孔吸光度值（請(qǐng)?jiān)?min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)）；

(7)以標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試的吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)品的濃度對(duì)數(shù)值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中磺胺多殘留的含量。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中，所述處理后的樣品是經(jīng)過以下處理的樣品：

(1)稱量2g組織（雞肉，魚肉），加入6ml乙酸乙酯，混合，渦旋3min；

(2)用4000r/min，離心5min.取上清液1ml氮吹；

(3)加入1ml正己烷與1ml樣品復(fù)溶液，混合，渦旋；

(4)用4000r/min，離心5min.取上清液1ml進(jìn)行分析檢測(cè)。