[發明專利]抗水解的聚丙烯酰胺凝膠在審
| 申請號: | 201410045971.8 | 申請日: | 2009-09-02 |
| 公開(公告)號: | CN103897017A | 公開(公告)日: | 2014-07-02 |
| 發明(設計)人: | C·勞維爾;C·帕納托尼;T·R·伯克曼;S·凱特;S·彼得森;L·奧列奇;楊雪梅 | 申請(專利權)人: | 生物輻射實驗室股份有限公司 |
| 主分類號: | C07K1/26 | 分類號: | C07K1/26 |
| 代理公司: | 上海專利商標事務所有限公司 31100 | 代理人: | 韋東 |
| 地址: | 美國加利*** | 國省代碼: | 美國;US |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 水解 聚丙烯酰胺 凝膠 | ||
1.一種通過電泳分離蛋白質混合物的方法,所述方法包括(i)將所述混合物樣品上樣于凝膠上,其中所述凝膠包含用含有三乙醇胺的緩沖溶液配制的交聯的聚丙烯酰胺,所述凝膠含有約0.03mM-0.3mM的三(羥甲基)氨基甲烷和約0.03M-0.3mM的雙(2-羥乙基)氨基-三(羥甲基)甲烷,或所述凝膠含有0.03mM-0.3mM的三(羥甲基)氨基甲烷但不含雙(2-羥乙基)氨基-三(羥甲基)甲烷,或所述凝膠含有0.03M-0.3mM的雙(2-羥乙基)氨基-三(羥甲基)甲烷但不含有三(羥甲基)氨基甲烷,并且(ii)在所述凝膠上施加電壓,使所述蛋白質在所述凝膠中以不同速率遷移,直到在所述凝膠中分離成多個條帶,其中,所述凝膠在上述用于上述步驟(i)和(ii)之前已被制備和儲存至少3天。
2.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述凝膠在所述步驟(i)和(ii)之前已被制備和儲存至少7天。
3.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述凝膠在所述步驟(i)和(ii)之前已被制備和儲存至少1個月。
4.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述凝膠在所述步驟(i)和(ii)之前已被制備和儲存至少6個月。
5.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述三乙醇胺在所述凝膠中的濃度為約10mM-250mM。
6.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述三(羥甲基)氨基甲烷在所述凝膠中的濃度為約0.03mM到約0.3mM,所述雙(2-羥乙基)氨基-三(羥甲基)甲烷在所述凝膠中的濃度為約0.03mM到約0.3mM。
7.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述三(羥甲基)氨基甲烷在所述凝膠中的濃度為約0.03mM到約0.3mM,且所述凝膠不含有雙(2-羥乙基)氨基-三(羥甲基)甲烷。
8.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述凝膠不含有三(羥甲基)氨基甲烷,且所述雙(2-羥乙基)氨基-三(羥甲基)甲烷在所述凝膠中的濃度為約0.03mM到約0.3mM。
9.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述凝膠還包含濃度50mM-500mM的甘氨酸。
10.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述凝膠還包含濃度約50mM-500mM的甘氨酸,以及相對所述甘氨酸比例約20摩爾%-60摩爾%的共軛兩性電解質。
11.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述三乙醇胺在所述凝膠中的濃度為約10mM-250mM,并且所述凝膠還包含濃度約50mM-500mM的甘氨酸,相對所述甘氨酸比例為約20摩爾%-60摩爾%的共軛兩性電解質,以及濃度約10mM-500mM的弱酸。
12.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述電壓為至少約350伏。
13.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述電壓為約400-600伏。
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