[發明專利]蘆筍與興安天門冬種間雜交F1代花藥培養再生植株的方法有效
| 申請號: | 201310707926.X | 申請日: | 2013-12-20 |
| 公開(公告)號: | CN103749293A | 公開(公告)日: | 2014-04-30 |
| 發明(設計)人: | 湯泳萍;陳光宇;周勁松;羅紹春;張岳平;謝啟鑫;尹玉玲;黃燕萍 | 申請(專利權)人: | 江西省農業科學院 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 南昌洪達專利事務所 36111 | 代理人: | 劉凌峰 |
| 地址: | 330030 江西*** | 國省代碼: | 江西;36 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 蘆筍 興安 天門 冬種 間雜 sub 花藥培養 再生 植株 方法 | ||
1.一種蘆筍與興安天門冬種間雜交F1代花藥培養再生植株的方法,其特征在于所述方法包括以下步驟:
(1)花蕾前處理:
取蘆筍種間雜交優良后代的花蕾作為花藥培養的供體,于黑暗條件下4℃處理1~7d,待用;
(2)花藥的剝取和培養:
將滅菌后的蘆筍種間雜交后代花蕾小心剝開,取花藥接入裝有添加激素和蔗糖的MS液體培養基的培養皿中,將培養皿在黑暗條件下于30℃~32℃恒溫熱激處理2~3d后,在黑暗條件下于23℃~28℃培養20~30d,至肉眼可見時,在黑暗條件下于23℃~28℃再振蕩培養20~25d,獲得胚狀體;
(3)胚狀體的再生:
將所述胚狀體接種到含有細胞分裂素的再生培養基中,在每天10~16?h光照和23℃~28℃下培養,形成再生芽;
(4)再生植株的獲得:
切取叢生芽接種至生根培養基中,將生長健壯的有根苗煉苗后移栽至基質中,得到再生植株;
(5)倍性鑒定:
??采用去壁低滲火焰干燥法處理再生植株的莖尖或根尖,進行染色體計數,以確定再生植株的倍性。
2.如權利要求1所述的一種蘆筍與興安天門冬種間雜交F1代花藥培養再生植株的方法,其特征在于,所述MS液體培養基的基本培養基均為MS,再添加0.5~0.8?mg﹒L-1的6-芐胺基腺嘌呤6-BA,0.5~1.0?mg﹒L-1的2,4-二氯苯氧乙酸2,4-D,0.1~0.2?mg﹒L-1萘乙酸NAA和占總質量6%~7%的蔗糖,pH5.8。
3.如權利要求1所述的一種蘆筍與興安天門冬種間雜交F1代花藥培養再生植株的方法,其特征在于,所述再生培養基是在MS培養基中添加0.2~0.3?mg﹒L-1的6-芐胺基腺嘌呤6-BA,占總質量3%~4%的蔗糖,pH5.8。
4.如權利要求1所述的一種蘆筍與興安天門冬種間雜交F1代花藥培養再生植株的方法,其特征在于,所述生根培養基是在MS培養基中添加0.05~0.1?mg﹒L-1的萘乙酸NAA,占總質量3%~4%的蔗糖,pH5.8。
5.如權利要求3或4所述的一種蘆筍與興安天門冬種間雜交F1代花藥培養再生植株的方法,其特征在于,所述再生培養基和生根培養基還添加有作為凝固劑為瓊脂,其占總質量的0.7%~0.8%。
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