技術領域

本發明涉及中藥制劑檢測技術領域，具體涉及以中藥為主要原料制成的金蓉消癖顆粒的指紋圖譜測定方法的建立。

背景技術

金蓉消癖顆粒是由淫羊藿、肉蓯蓉、郁金、丹參、莪術、益母草、女貞子、制何首烏、鱉甲及牡蠣為主要原料經適宜的提取、加工而制成，例如中國專利ZL200510034765.8。其具有補腎活血、化痰散結、調攝沖任的功效，用于治療乳腺增生病痰瘀互結、沖任失調證，且療效已得到臨床試驗的驗證。藥理實驗表明，其能降低血清雌二醇、黃體生成素含量，升高孕酮、促卵泡激素含量，調節血液中雌孕激素的相對平衡，改善血液流變性，降低乳腺增生的乳腺小葉數、腺泡數、腺泡腔直徑以及胞漿面積，改善乳腺結構，具有鎮痛和抗炎作用。臨床研究結果證實，金蓉消癖顆粒根據補益肝腎、調理沖任以治本，疏肝理氣活血、化痰散結以治標的治療原則組方，對治療痰瘀互結、沖任失調型的乳腺增生病療效確切，具有“標本兼治、病證合醫”的效果。

中藥指紋圖譜是指某種中藥材或中成藥中所共有的、具有特征性的某類或數類成分的色譜或光譜的圖譜。在現階段，中藥的有效成分絕大多數沒有明確的情況下，中藥指紋圖譜對于有效控制中藥材或中成藥的質量具有重要的意義。美國FDA最近幾年制定的植物藥指南中已經明確把指紋圖譜作為混合物質群的質量控制方法。英國草藥典、印度草藥典以及加拿大藥用及芳香植物學會、德國藥用植物學會也接受色譜指紋圖譜。中國國家藥品監督管理部門于2000年發布了《中藥注射劑的指紋圖譜研究的技術要求》，明確要求對新申報的中藥注射劑和已上市的中藥注射劑實行指紋圖譜標準。

目前金蓉消癖顆粒采用的質量控制方法是參照《中國藥典》2010年版一部顆粒劑的有關要求，主要是采用TLC鑒別，只有一個HPLC含量測定項目，用于測定本品中淫羊藿苷的含量，顯然現有的質量控制方法未能達到全面控制產品質量的目的。

發明內容

本發明的目的在于提供一種金蓉消癖顆粒指紋圖譜的建立方法，該方法具有簡便、穩定、精密度高、重現性好、易于掌握的特點，采用該方法可以有效控制金蓉消癖顆粒的質量。

本發明的金蓉消癖顆粒指紋圖譜的建立方法，其特征在于包括以下步驟：

供試品溶液的制備：取金蓉消癖顆粒成品，研細，精密稱定，加50%甲醇，加熱回流，放冷，濾過，定容，過微孔濾膜，取續濾液，即得，其中金蓉消癖顆粒為中藥制劑，包括淫羊藿、肉蓯蓉、郁金、丹參、莪術、益母草、女貞子、制何首烏、鱉甲及牡蠣；

對照品溶液的制備：精密稱取松果菊苷對照品、毛蕊花糖苷對照品、丹酚酸B對照品、淫羊藿苷對照品，加甲醇制成含各對照品的混合溶液，過微孔濾膜，取續濾液，即得對照品溶液；

測定：精密吸取供試品溶液、對照品溶液，分別注入高效液相色譜儀，以松果菊苷對照品的色譜峰相對保留時間和峰面積為1，計算供試品色譜峰的相對保留時間和相對峰面積，得到指紋圖譜，其中色譜條件：采用碳十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，以甲醇為流動相A，以0.1%甲酸溶液為流動相B，進行梯度洗脫，檢測波長為320nm，。

所述的梯度洗脫程序為：

0min時，流動相A：流動相B=26:74

10min時，流動相A：流動相B=39:61

17min時，流動相A：流動相B=43:57

25min時，流動相A：流動相B=50:50

35min時，流動相A：流動相B=58:42

40min時，流動相A：流動相B=75:25。

所述的供試品溶液由金蓉消癖顆粒1g溶于100ml50％甲醇中制得。

所述的對照品溶液中每1ml甲醇含松果菊苷對照品50μg、毛蕊花糖苷對照品30μg、丹酚酸B對照品50μg、淫羊藿苷對照品30μg。

所述的指紋圖譜標記出13個共有峰，其中2號峰為松果菊苷峰，記為參照峰（S），4號峰為毛蕊花糖苷峰，7號峰為丹酚酸B，10號峰為淫羊藿苷峰。

為了建立金蓉消癖顆粒全面有效的質量評價方法，確保金蓉消癖顆粒質量穩定，使其質量控制技術更完善，本發明提供了一種金蓉消癖顆粒的指紋圖譜測定方法。在本發明中，通過高效液相色譜法建立起金蓉消癖顆粒的HPLC指紋圖譜，從色譜的整體面貌特征上把握金蓉消癖顆粒的質量情況。本發明是在大量實驗基礎上所得到的切實可行的方法，可以作為金蓉消癖顆粒的質量控制標準，可以全面控制產品的質量。本發明具有如下優點：