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[發明專利]一種脫二氧喹烯酮半抗原及其制備方法和其應用有效

專利信息
申請號: 201310326004.4 申請日: 2013-07-30
公開(公告)號: CN103360328A 公開(公告)日: 2013-10-23
發明(設計)人: 沈建忠;程林麗;王戰輝;張素霞;高海祥 申請(專利權)人: 中國農業大學
主分類號: C07D241/42 分類號: C07D241/42;C07K14/765;C07K16/44;G01N33/535
代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 代理人: 關暢
地址: 100094 *** 國省代碼: 北京;11
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 一種 二氧 喹烯酮 半抗原 及其 制備 方法 應用
【權利要求書】:

1.一種脫二氧喹烯酮半抗原,具有式Ⅰ所示的化學結構:

2.權利要求1所述半抗原的制備方法,包括下述步驟(1)和(2):

(1)將乙酰甲喹和低亞硫酸鈉于60℃反應2小時,即得3-甲基-2-乙酰喹噁啉;所述乙酰甲喹和低亞硫酸鈉的摩爾比為1:1.8;

(2)將3-甲基-2-乙酰喹噁啉和對甲酰苯甲酸在堿催化劑作用下,于40℃反應12h,再室溫反應過夜,即得脫二氧喹烯酮半抗原;所述3-甲基-2-乙酰喹噁啉和對甲酰苯甲酸的摩爾比為1:1.2。

3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于:所述步驟(1)中,所述反應在溶劑中進行,所述溶劑為四氫呋喃、100%乙醇和蒸餾水的混合溶劑,所述四氫呋喃、100%乙醇和蒸餾水的體積比為2:10:1;所述步驟(2)中,所述反應在溶劑中進行,所述溶劑為四氫呋喃、乙醇和水的混合物;所述步驟(2)中,所述堿催化劑為氫氧化鈉。

4.根據權利要求2或3所述的方法,其特征在于:所述步驟(1)中,所述反應完畢后還包括濃縮過程和純化過程。

5.根據權利要求2或3所述的方法,其特征在于:所述步驟(2)中,所述反應完畢后還包括純化過程。

6.權利要求1所述脫二氧喹烯酮半抗原或由權利要求2-5任意所述方法直接得到的脫二氧喹烯酮半抗原作為半抗原的用途。

7.權利要求1所述脫二氧喹烯酮半抗原或由權利要求2-5任意所述方法直接得到的脫二氧喹烯酮半抗原在檢測脫二氧喹烯酮中的用途;

或,權利要求1所述脫二氧喹烯酮半抗原或由權利要求2-5任意所述方法直接得到的脫二氧喹烯酮半抗原在制備檢測脫二氧喹烯酮產品中的用途。

8.一種抗原,為權利要求1所述脫二氧喹烯酮半抗原或由權利要求2-5任意所述方法直接得到的脫二氧喹烯酮半抗原與牛血清白蛋白的偶聯物。

9.一種多克隆抗體,所述多克隆抗體是將權利要求1所述脫二氧喹烯酮半抗原或由權利要求2-5任意所述方法直接得到的脫二氧喹烯酮半抗原與牛血清蛋白的偶聯物作為抗原免疫動物后獲得的。

10.一種特異性檢測脫二氧喹烯酮的試劑盒,所述試劑盒包括下述1)-9):

1)碳酸鹽緩沖液:

Na2CO3????????????1.59g/L

NaHCO3????????????2.93g/L

溶劑為蒸餾水;

2)將權利要求1所述脫二氧喹烯酮半抗原或由權利要求2-5任意所述方法直接得到的脫二氧喹烯酮半抗原與卵清蛋白的偶聯物作為包被抗原;

3)封閉液:

小牛血清???????????50ml/L

蔗糖???????????????50g/L

酪蛋白?????????????2.5g/L

Na2HPO4·12H2O?????5.8g/L

NaH2PO4·2H2O??????0.593g/L

Proclin300?????????300μl/L

溶劑為蒸餾水;

4)磷酸鹽緩沖液:

Na2HPO4.12H2O???????3.12g/L

NaH2PO4.2H2O????????1.76g/L

溶劑為蒸餾水;

5)HRP-羊抗兔IgG;

6)底物緩沖液:

Na2HPO4.12H2O??????????36.8g/L

檸檬酸?????????????????9.33g/L

溶劑為蒸餾水;

7)3,3',5,5'-四甲基聯苯胺溶液:

TMB???????????????????????????96.15mg/L

乙二醇????????????????????????38.46mL/L

質量分數為30%的過氧化氫???????961μL/L

Na2HPO4.12H2O?????????????????35.4g/L

檸檬酸????????????????????????8.97g/L

溶劑為蒸餾水;

8)H2SO4溶液:

質量分數為98%的濃硫酸????????2mol/L

溶劑為蒸餾水;

9)將權利要求1所述脫二氧喹烯酮半抗原或由權利要求2-5任意所述方法直接得到的脫二氧喹烯酮半抗原與牛血清蛋白的偶聯物作為抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體。

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