[發明專利]一種高保真DNA聚合酶及其制備和應用有效
| 申請號: | 201310268966.9 | 申請日: | 2013-06-28 |
| 公開(公告)號: | CN104250641B | 公開(公告)日: | 2017-09-01 |
| 發明(設計)人: | 葛猛;夏霞宇;余倩;王宏偉 | 申請(專利權)人: | 北京福安華生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N9/12 | 分類號: | C12N9/12;C12N15/54;C12N15/70;C12N15/10 |
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| 地址: | 100071 北京市豐臺區*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 高保真 dna 聚合 及其 制備 應用 | ||
1.一種高保真DNA聚合酶,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.如權利要求1所述的高保真DNA聚合酶在核酸擴增中的應用。
3.一種編碼如權利要求1所述的高保真DNA聚合酶的DNA分子,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
4.一種重組載體,其特征在于,其含有如權利要求3所述的DNA分子。
5.根據權利要求4所述的重組載體,其特征在于,其為含有T7啟動子的重組載體。
6.一種PCR擴增試劑盒,其特征在于,其含有高保真DNA聚合酶;所述的高保真DNA聚合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
7.一種高保真DNA聚合酶的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
獲得具有編碼氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的DNA分子;
取所述DNA分子與表達載體融合,構建重組表達載體;
取所述重組表達載體轉入宿主細胞,獲得轉化體;
誘導所述轉化體表達融合蛋白,經分離純化,獲得高保真DNA聚合酶。
8.根據權利要求7所述的制備方法,其特征在于,所述DNA分子的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
9.根據權利要求7所述的制備方法,其特征在于,所述宿主細胞為原核系統宿主細胞。
10.根據權利要求9所述的制備方法,其特征在于,所述原核系統宿主細胞為大腸桿菌。
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