[發明專利]一種H9N2禽流感病毒及其用途無效
| 申請號: | 201210537594.0 | 申請日: | 2010-06-04 |
| 公開(公告)號: | CN103013928A | 公開(公告)日: | 2013-04-03 |
| 發明(設計)人: | 劉佩紅;周錦萍;葛菲菲;劉健;張維誼;鞠厚斌;李凱航 | 申請(專利權)人: | 上海市動物疫病預防控制中心 |
| 主分類號: | C12N7/00 | 分類號: | C12N7/00;C12Q1/70;C12Q1/68;A61K39/145;A61P31/16;C07K16/10;C12R1/93 |
| 代理公司: | 上海申匯專利代理有限公司 31001 | 代理人: | 林煒 |
| 地址: | 201103 上*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 h9n2 禽流感 病毒 及其 用途 | ||
1.一種分離的H9N2禽流感病毒,其基因組由SEQ?ID?NO:17、SEQ?ID?NO:18、SEQ?ID?NO:19、SEQ?ID?NO:20、SEQ?ID?NO:21、SEQ?ID?NO:22、SEQ?ID?NO:23和SEQ?ID?NO:24所示的RNA片段組成。
2.如權利要求1所述的一種分離的H9N2禽流感病毒,其保藏號為CGMCC?NO:3119。
3.一種用于檢測權利要求1或2所述的分離的H9N2禽流感病毒的試劑盒,其特征在于含有權利要求1或2所述的分離的H9N2禽流感病毒的RNA抽提液、RT反轉錄反應液和含有引物的PCR反應液,所述的PCR反應液中的引物為:
HA基因上游引物P1:?5’-CAGGGGAATTTCACAACCAGTCAAA-3’ ,
下游引物P2:?5’-GCCAGGGTGTTTTTGCCAATTATATAC-3’;
M基因上游引物P1:5’-AAGATGAGCCTTCTAACCGAGGTC-3’,
下游引物P2:?5’-?CGGGGTAGTTTTTTACTCCAGCTCTATG-3’;
NA基因上游引物P1:5’-?AGCAGGAGTGAAAATGAATCCA-3’,
下游引物P2:?5’-?AATTGCGAGAGCTTATATAGGC-3’;
NP基因上游引物P1:5’-?ATCATGGCGTCTCAAGGCACCAAA-3’,
下游引物P2:?5’-?GCCTCTTTAATTGTCATACTCCCCTGC-3’;
NS基因上游引物P1:5’-?ACATAATGAACTCCAACACTGTGTC-3’,
下游引物P2:?5’-?GCAAATAAGCTGAAACGAGAAAGTTC-3’;
PA基因上游引物P1:5’-?AAATGGAAGACTTTGTGCGACAATG-3’,
下游引物P2:?5’-?ACAACTATCTCAGTGCATGTGTGAG-3’;
PB1基因上游引物P1:5’-?AGGCAAACCATTTGAATGGATGTCA-3’,
下游引物P2:?5’-?AATTCACTATTTTTGCCGTCTGAGC-3’;
PB2基因上游引物P1:5’-?GCGAAAGCAGGTCAATTATATTCAG-3’,
下游引物P2:?5’-?AACAATTCGACACTAATTGATGGCC-3’。
4.一種用于預防權利要求1或2所述的H9N2禽流感病毒的疫苗,其特征在于:含有滅活的權利要求1或2所述的H9N2禽流感病毒。
5.權利要求4所述的用于預防H9N2禽流感病毒的疫苗的制備方法,其特征在于包括如下步驟:a),一個疫苗抗原液制備及毒價測定的步驟,將權利要求1或2所述的H9N2禽流感病毒用滅菌生理鹽水稀釋后,接種非免疫雞胚,收取尿囊液,測定其毒價:在109.6-109.8ELD50,HA價在1:256-512之間,病毒液置冰箱中保存備用;
b),一個抗原液滅活的步驟,將福爾馬林溶液加入病毒液中,檢驗合格后作為制備抗原液;
c),一個制備油相佐劑的步驟;
d),?一個制備疫苗水相的步驟;
????e),?一個配制疫苗的步驟,將油相與水相預混后,?再將混合物注入到高壓勻漿泵內乳化,制成油包水乳劑即為疫苗。
6.如權利要求5所述的用于預防H9N2禽流感病毒的疫苗的制備方法,其特征在于:所述的油相佐劑由白油?、司本-80?和硬脂酸鋁配制混合而成。
7.如權利要求5所述的用于預防H9N2禽流感病毒的疫苗的制備方法,其特征在于:在制備疫苗水相的步驟中,將吐溫-80經高溫滅菌后,加入到己滅活抗原液中,吐溫-80的終濃度在2%-5%之間,經充分溶解混合即為水相。
8.一種抗體,抗權利要求1或2所述的一種分離的H9N2禽流感病毒。
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