技術領域

本發明屬生物檢測領域，具體涉及抗黃曲霉毒素通用單克隆抗體1C11在黃曲霉毒素B1熒光淬滅中的應用及方法。?

背景技術???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????

黃曲霉毒素是一類結構類似的化合物，自然界中的黃曲霉毒素主要是由黃曲霉菌和寄生曲霉產生的次級代謝產物。目前發現的黃曲霉毒素有二十余種，其中以黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2和M1最為常見。黃曲霉毒素能對人及動物的肝臟組織產生破壞作用，嚴重時可導致肝癌甚至死亡。黃曲霉毒素被世界衛生組織劃定為Ⅰ類致癌物，以黃曲霉毒素B1毒性最強，其毒性是砒霜的68倍。

黃曲霉毒素可發生在熱帶或亞熱帶地區的農產品出產過程中，同時在儲藏、運輸等環節也可能引入黃曲霉毒素的污染。花生是最易發現有黃曲霉毒素的農產品，其他如玉米、無花果、果仁及谷物都有可能受黃曲霉毒素污染。由于我國小農戶分散型的種植模式，農產品從農田到餐桌的各個環節都有可能受到黃曲霉毒素的污染。而黃曲霉毒素毒性大，危害嚴重，?

黃曲霉毒素作為一類天然污染物，不同于化學殘留，緊靠法律法規手段很難實現有效控制。因此，檢測技術在黃曲霉毒素污染監控中顯得尤為重要。

化學殘留標記免疫分析是生物檢測領域常用的一種方法，其是通過加入熒光標記材料進行熒光標記，然后加入熒光淬滅試劑進行分析檢測。常見的熒光淬滅試劑包括鹵素離子、重金屬離子、硝基化合物、重氮化合物等。而考慮到黃曲霉毒素B1自身具有較強的熒光特性，容易對標記材料的熒光產生干擾，因此，一直沒有黃曲霉毒素B1的基于標記材料熒光淬滅特性的免疫分析技術研究報道。?

發明內容

本發明所要解決的技術問題是針對上述現有技術存在的不足而提供抗黃曲霉毒素通用單克隆抗體1C11在黃曲霉毒素B1熒光淬滅中的應用及方法。其可使黃曲霉毒素B1熒光淬滅，方法簡單、可靠。?

本發明為解決上述技術問題所采用的技術方案為：?

抗黃曲霉毒素通用單克隆抗體1C11在黃曲霉毒素B1熒光淬滅中的應用，其中：所述的抗黃曲霉毒素通用單克隆抗體1C11由保藏號為CCTCC?NO.?C201013的雜交瘤細胞株1C11分泌產生。該雜交瘤細胞株已于2010年7月13日保藏于中國典型培養物保藏中心（CCTCC），保藏地址是，中國，武漢，武漢大學，保藏編號為CCTCC?NO.?C201013。

抗黃曲霉毒素通用單克隆抗體1C11在黃曲霉毒素B1熒光淬滅中的應用方法，其特征在于：它是在含有黃曲霉毒素B1的樣品溶液中加入抗黃曲霉毒素通用單克隆抗體1C11，使黃曲霉毒素B1熒光淬滅。?

按上述方案，所述為使黃曲霉毒素B1的熒光進行充分淬滅，在黃曲霉毒素B1的樣品溶液中加入抗黃曲霉毒素通用單克隆抗體1C11后先混勻，然后于37±5℃放置至少0.5h。?

按上述方案，還包括根據以下方法測定熒光淬滅率：將含有黃曲霉毒素B1的樣品溶液中在未加入抗黃曲霉毒素通用單克隆抗體1C11前，先于365nm激發波長激發下獲取其熒光發射光譜，記錄440nm處（熒光發射光譜中熒光強度最大處對應的波長）的熒光強度值；然后再加入抗黃曲霉毒素通用單克隆抗體1C11進行淬滅后，再于365nm激發波長激發下獲取其熒光發射光譜，記錄440nm處（熒光發射光譜中熒光強度最大處對應的波長）的熒光強度值，根據以下公式計算熒光淬滅率：?

熒光淬滅率=熒光被抗黃曲霉毒素通用單克隆抗體1C11淬滅強度值即加入抗黃曲霉毒素通用單克隆抗體1C11淬滅前后的440nm處的兩個熒光強度的差值/加入抗黃曲霉毒素通用單克隆抗體1C11淬滅前的熒光強度值。

按上述方案，上述方法中在含有黃曲霉毒素B1的樣品中加入抗黃曲霉毒素通用單克隆抗體1C11時，使抗黃曲霉毒素通用單克隆抗體1C11的濃度達到使體系中黃曲霉毒素B1的熒光充分淬滅的最小濃度，以使樣品中黃曲霉毒素B1的熒光進行充分淬滅。?