1.一種基于合成肽檢測羊痘病毒血清抗體的試劑盒，其特征在于包括以下步驟制備而成：

a.利用DNAstar軟件設計針對羊痘病毒主要免疫蛋白P32的兩條短肽片段；

b.將步驟a所設計序列采用常規合成肽方法合成肽段；

c.采用方正滴定方法，確定合成肽抗原包被ELISA板的濃度；

d.?將陰性、陽性血清用PBS稀釋為1:10，1:20，1:40，1:80，1:160　5個稀釋度，進行ELISA檢測，取P/N值最大、OD值接近1的血清最大稀釋倍數為最適稀釋度，確定陽性血清、陰性血清及待檢血清稀釋度和反應時間；

e.利用棋盤滴定法選擇工作濃度，根據“陽性血清OD值接近1”和“陽性值/陰性值最大”的原則，確定酶標記抗體工作濃度及反應時間；

f.?采集未免疫過羊痘病毒疫苗的健康羊血清，測其OD值并除以標準陰性血清的OD值(S/N，樣品/陰性),?將所得到比值的平均值加標準差作為判定陰/陽性的臨界值。

2.根據權利要求1所述一種基于合成肽檢測羊痘病毒血清抗體的試劑盒，其特征在于，所述肽段序列如下：

A：PELKSDNDIFYKKVDTVKDFKNSDVNFFLKDKKDDI

B:?YKLEKELKLNRQVLNDSSKYILHNTKYLSKKRANEMKN。

3.根據權利要求1或2所述一種基于合成肽檢測羊痘病毒血清抗體的試劑盒，其特征在于:所述步驟c確定合成肽最佳包被濃度為0.3ug/孔，其中A:B的比例為1:1。

4.權利要求1或2所述一種基于合成肽檢測羊痘病毒血清抗體的試劑盒，其特征在于：所述步驟d的標準陽性血清、標準陰性血清和待檢血清樣品稀釋度的體積比均為1:20；標準陽性血清、標準陰性血清和待檢血清最佳反應時間為45min。

5.權利要求1或2所述一種基于合成肽檢測羊痘病毒血清抗體的試劑盒，其特征在于：所述步驟e酶標抗體工作濃度為：用PBS將兔抗羊IgG-HRP(辣根過氧化物酶標記免疫球蛋白G)作1:400體積比稀釋為酶標記抗體的最佳稀釋度；酶標抗體最佳反應時間為45?min。

6.權利要求1所述一種基于合成肽檢測羊痘病毒血清抗體的試劑盒，其特征在于：所述步驟f確定的判定標準為：S/N值≥2.20為陽性，S/N值≤1.65為陰性，S/N值介于2.20和1.65之間者為可以，應重測，重測后S/N≥2.20判為陽性，S/N值＜2.20判為陰性。