技術領域

本發(fā)明涉及植物提取領域，具體涉及一種銀杏內(nèi)酯的提取分離方法。

背景技術

自上世紀60年代開始，許多國家采用現(xiàn)代分離技術對銀杏葉的化學成分進行研究，經(jīng)藥理實驗和臨床驗證，發(fā)現(xiàn)銀杏葉的多方面生物活性與其所含特定化學成分有關。德國Dr.Willar?Schwabe首次注冊了銀杏葉的一種簡單提取物，于1972年申請了專利(W?Schwabe?DE?176708和DE?2117429)，定名為EGb761，用于治療心腦血管疾病和神經(jīng)系統(tǒng)疾病，具有顯著療效，且無毒副作用，銀杏內(nèi)酯類化合物(ginkgolids)具有強血小板活化因子(PAF)拮抗作用。銀杏制劑被列為治療藥物的國家有德國、法國和中國，其他國家均用為保健食品或非處方用藥，美國開發(fā)出的銀杏保健食品已經(jīng)獲得FDA批準。

銀杏內(nèi)酯屬于萜類化合物，稱為萜類內(nèi)酯，由倍半萜內(nèi)酯和二萜內(nèi)酯組成，是銀杏葉中一類重要的活性成分。白果內(nèi)酯(bilobalide)屬倍半萜內(nèi)酯，由R.T.Major于1967年和K.Weinges于1969年分離得到，目前從銀杏葉中發(fā)現(xiàn)的唯一的一個倍半萜內(nèi)酯化合物，銀杏內(nèi)酯A、B、C、M、J(ginkgolidA、B、C、M、J)為二萜內(nèi)酯化合物，于1932年由S.Furukawa首次從銀杏葉中分離出來，1967年才由K.Nakanish、M.Maruyama和K.Okabe等人進一步分離和確定其化學結構。從結構上看，白果內(nèi)酯類分子骨架由15個碳原子組成，具有互相稠合在一起的4個五元環(huán)，其中有1個五元碳環(huán)，3個五元內(nèi)酯碳環(huán)，五元環(huán)上連有1個天然產(chǎn)物中罕見的叔丁基。白果內(nèi)酯有很強的生物活性，具有促進神經(jīng)生長的作用，可防止腦細胞線粒體氧化應激引起的功能改變，改善老年記憶功能，防止老年癡呆的發(fā)生，以及防止腦、脊髓神經(jīng)脫髓鞘作用，其神經(jīng)營養(yǎng)、神經(jīng)保護作用比銀杏內(nèi)酯強。銀杏內(nèi)酯B有抗炎、抗休克、保護心腦血管、治療急性胰腺炎等作用。而銀杏內(nèi)酯類化合物的分子骨架由20個碳原子組成，具有6個五元環(huán)，其中有2個五元碳環(huán)，3個五元內(nèi)酯環(huán)，1個四氫呋喃環(huán)，兩個五元碳環(huán)以螺環(huán)的形式連接在一起，其余的環(huán)以稠合的方式連接，形成一個剛性蘢狀的特殊立體化學結構。銀杏內(nèi)酯分子中均具有天然產(chǎn)物中罕見的叔丁基。銀杏內(nèi)酯包括二萜類和倍半萜類內(nèi)酯，二萜類內(nèi)酯主要有銀杏內(nèi)酯A、B、C、J、M等，半萜類內(nèi)酯有白果內(nèi)酯。

自20世紀70年代初發(fā)現(xiàn)了PAF后，藥理學家對銀杏內(nèi)酯進行了研究，明確銀杏萜內(nèi)酯是強血小板活化因子拮抗劑，免疫系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、缺血損傷有保護作用，并有抗休克、抗過敏及抗炎作用。銀杏內(nèi)酯A、B、C、M、J結構差別在于含有的羥基數(shù)目和羥基連接的位置不同。銀杏內(nèi)酯均為強血小板活化因子拮抗劑，是銀杏葉中特殊生理活性的關鍵成分。

銀杏內(nèi)酯A結構式????????????????????????銀杏內(nèi)酯B結構式

分子式：C₂₀H₂₄O₉分子量：408.4????分子式：C₂₀H₂₄O₁₀分子量：424.4

銀杏內(nèi)酯C結構式????????????????????????白果內(nèi)酯結構式

分子式：C₂₀H₂₄O₁₁分子量：440.4????分子式：C₁₅H₁₈O₈分子量：326.3

銀杏內(nèi)酯對血小板活化因子PAF受體有強大的特異性抑制作用，其中銀杏內(nèi)酯的抗PAF活性最高。PAF是血小板和多種炎癥組織分泌產(chǎn)生的一種內(nèi)源性磷脂，是迄今發(fā)現(xiàn)的最有效的血小板聚集誘導劑，它與許多疾病的產(chǎn)生、發(fā)展密切相關。而銀杏內(nèi)酯目前被認為是最有臨床應用前景的天然PAF受體拮抗劑，其拮抗作用活性與化學結構密切相關。當內(nèi)酯結構中R3為羥基或羥基數(shù)目增多時，對PAF的拮抗活性減弱，而當R2為羥基且R3為H時，則活性顯著增強，其中以銀杏內(nèi)酯B對PAF產(chǎn)生的拮抗作用最強。